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宫颈分泌物的病原菌分布及耐药性研究

2020-09-08 331 上传者：管理员

摘要：目的：分析宫颈分泌物的病原菌分布及耐药性。方法：选取2014年4月至2017年8月本院产科及妇科送检的宫颈分泌物进行培养和分离，用VITEK-2型微生物鉴定及药敏分析仪对病原菌进行鉴定及药敏试验。结果：送检的宫颈分泌物标本共分离出1698株细菌，其中，革兰氏阴性菌373株（21.97%），主要以大肠埃希菌为主，共282株，占16.61%；革兰氏阳性菌1120株（65.96%），主要以表皮葡萄球菌为主，共388株，占22.85%；真菌205株（12.07%），主要以白色念珠菌为主，共138株，占8.13%。常见革兰氏阴性菌对阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率最高，常见革兰氏阳性菌对万古霉素的敏感率最高。结论：本院送检的宫颈分泌物培养阳性率较高，且病原菌分布较广，耐药率较高，临床医生应根据实验室提供的病原菌鉴定和药敏试验结果诊断和治疗女性生殖道感染疾病。

关键词：
宫颈分泌物
抗菌药物
病原菌
耐药性
药敏试验
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随着广谱抗菌药物的广泛应用，细菌的耐药性呈现逐年升高的趋势，已成为临床研究的重点[1]。女性生殖道感染不仅危害患者身体健康，妊娠期生殖道感染还会危害胎儿或新生儿健康[2]。近年来，生殖道感染引起了人们的广泛关注[3]。临床研究发现，目前感染女性生殖道的病原体有多种，主要包括真菌、原虫、病毒和细菌、支原体属[4]、衣原体属等[5]。而造成感染的途径一般为2种：血行感染和上行感染，比较常见的是上行感染[6]。本研究对本院2014年4月至2017年8月产科及妇科送检的的宫颈分泌物进行分离培养，分析病原菌分布及耐药性，旨在为临床诊断和治疗女性生殖道感染性疾病提供理论依据，现报道如下。

1、材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源

选取本院2014年4月至2017年8月产科、妇科住院患者宫颈分泌物分离的病原菌，并去除同一患者重复菌株。

1.1.2 试剂与仪器

革兰氏阳性细菌鉴定卡、药敏卡，革兰氏阴性细菌鉴定卡、药敏卡均购于美国BioMerieux’Inc公司。STIKIL-196HI型CO2培养箱购自施都凯仪器设备（上海）有限公司；VITEK-2型微生物鉴定及药敏分析仪购自法国梅里埃生物公司；康宝净化工作台购自济南康宝净化设备有限责任公司。

1.1.3 质控菌株

质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853，均购于卫生部临床检验中心。

1.2 方法

1.2.1 宫颈分泌物培养

送检的宫颈分泌物标本在2h内接种至血平板和巧克力平板上，置CO2培养箱37℃培养24h，分离病原菌，操作严格按照《全国临床检验操作规程》进行。

1.2.2 细菌鉴定及药敏试验

取符合要求的病原菌做鉴定及药敏试验，革兰染色镜检，判断细菌属性，用特制无菌水调整病原菌至适宜浓度，至梅里埃VITEK-2型微生物鉴定及药敏分析仪做细菌鉴定和药敏试验，结果严格按照美国临床和实验室标准协会（CLSI)2010版的标准判读：包括耐药、中介和敏感。

1.3 观察指标

病原菌分布及耐药性。

1.4 统计学方法

采用WHONET5.6软件进行数据分析，统计分析宫颈分泌物病原菌的分布情况及药物敏感性。

2、结果

2.1 病原菌的分布及构成

共分离出1698株病原菌，其中革兰氏阳性菌1120株（65.96%），且以表皮葡萄球菌388株（22.85%）占比最高，其次为粪肠球菌92株（5.42%）和人葡萄球菌人亚种67株（3.95%）；革兰氏阴性菌373株（21.97%），且以大肠埃希菌282株（16.61%）占比最高，其次为肺炎克雷伯菌23株（1.35%）和产酸克雷伯菌19株（1.12%）；真菌205株（12.07%），且以白色念珠菌多见，达138株（8.13%），其次为热带念珠菌34株（2.0%）和光滑假丝酵母18株（1.06%），见表1。

表1宫颈分泌物病原菌的分布情况

2.2 革兰氏阳性菌分布

宫颈分泌物检出的革兰氏阳性菌主要由葡萄球菌属、肠球菌属、链球菌属和革兰氏阳性杆菌构成。葡萄球菌属有629株，由17种葡萄球菌构成，且以凝固酶阴性葡萄球菌为主；肠球菌属118株，由5种肠球菌构成；链球菌属75株，由7种链球菌构成；此外，还有277株革兰氏阳性杆菌，因种类繁多，且实验室不能鉴定，所以未做统计，见表2。

表2革兰氏阳性菌分布情况

2.3 革兰氏阳性菌药敏结果

缓慢葡萄球菌对6种抗菌药物的敏感率最高，均达到100.00%；金黄色葡萄球菌和溶血葡萄球菌对利福平、利奈唑胺和万古霉素的敏感率均达到100.00%，但金黄色葡萄球菌对呋喃妥因、莫西沙星和替加环素的敏感率较低，为77.78%；表皮葡萄球菌和人葡萄球菌人亚种对6种抗菌药物的敏感率均达到95%以上；粪肠球菌对利福平的敏感率较低，只有5.43%，但对其他5种抗菌药物的敏感率较高，均达到80%以上，见表3。

2.4 革兰氏阴性菌药敏结果

阴沟肠杆菌对7种抗菌药物的敏感率最高，除哌拉西林/他唑巴坦外，均达到100.00%；其他的革兰氏阴性菌对阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率较高，均达到85%以上，且大肠埃希菌对亚胺培南和厄他培南的敏感率也达到80%以上；奇异变形杆菌对环丙沙星、妥布霉素和左氧氟沙星的敏感率均达到85%以上；产酸克雷伯菌属的药敏结果相似，且敏感率均较高，见表4。

3、讨论

正常情况下，女性由于生殖道和宫颈黏液的屏障作用，上生殖道是无菌的[7]。当机体免疫力低下时，机体菌群失调，下生殖道的条件致病菌移行至上生殖道，可导致术后感染，引起宫颈炎的疾病[8]。

表3革兰氏阳性菌对抗菌药物的敏感率(%)

表4革兰氏阴性菌对抗菌药物的敏感率（%）

本研究结果表明，本院宫颈分泌物病原菌主要以革兰氏阳性菌为主，达1120株，占65.96%；常见革兰氏阳性菌主要由葡萄球菌属和肠球菌属构成，且以凝固酶阴性葡萄球菌多见，此外，还有链球菌属和未鉴定的阳性杆菌，实验室对革兰氏阳性杆菌未做菌种鉴定和药敏，在以后的实验中需完善。凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌是医院感染的主要病原菌，本院检出率较高，预防胎膜早破孕妇或新生儿发生金黄色葡萄球菌感染，是保证产科医疗安全质量的一项重要措施[9]，因此，产科病房应实时监测。此外，革兰氏阴性菌和真菌所占比例也很高，分别为373株（21.97%）和205株（12.07%）。革兰氏阴性菌主要以大肠埃希菌为主，产酸克雷伯菌属在本院宫颈分泌物中也较多见。有研究表明，孕妇阴道和子宫颈部的大肠埃希菌是产科疾病的重要致病菌[10]，因此，产科医生应加强宫颈分泌物的送检意识。真菌主要以白色念珠菌为主，白色念珠菌广泛寄生于人体各个部位，通常不致病，只有当机体免疫力下降，或长期服用广谱抗生素、激素、免疫抑制剂、化学药物治疗、放射治疗等，才会引起白色念珠菌的继发感染[11]。本研究未做真菌的药敏试验，在今后需完善实验室检测项目，及时准确地为患者提供合理的治疗方案。

药敏结果表明，葡萄球菌属有相似的抗菌药物，但金黄色葡萄球菌对呋喃妥因、莫西沙星和替加环素的敏感率相对于凝固酶阴性葡萄球菌较弱，万古霉素对葡萄球菌属和粪肠球菌的敏感率均较高。近年来，有报道认为肠球菌属对氨苄西林和庆大霉素的耐药率逐渐增多，且出现耐万古霉素的肠球菌，已使肠球菌所致的重症感染治疗成为临床的棘手问题[12]。本研究未发现耐万古霉素的肠球菌，临床在选择抗菌药物时应根据实验室的药敏结果。粪肠球菌对利福平的敏感率较低，仅5.43%，但葡萄球菌属对利福平均有较高的敏感率，达90%以上。万古霉素是治疗革兰氏阳性菌最有效的药物，但其价格昂贵，药效太强，不良反应多，仅能应用于重症感染时。呋喃妥因价格低廉，且敏感性较高，对葡萄球菌属和粪肠球菌感染的患者治疗效果较好，可优先考虑。

药敏试验结果显示，几种常见革兰氏阴性菌对阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的敏感率较高，但阿米卡星具有肾毒性，肾功能不全的患者不宜使用[13]。大肠埃希菌和克雷伯菌属检出率较高，这两类细菌是易产ESBLs的细菌[14]。产ES-BLs的细菌对多数抗菌药物的耐药性均高于非产ESBLs的细菌，临床医生在治疗慢性感染时，应根据药敏结果选择合理的抗菌药物，使治疗具有针对性[15]。阴沟肠杆菌和产酸克雷伯菌属的药敏结果相似，且敏感率均较高，临床对抗菌药物的选择较多；奇异变形杆菌对亚胺培南的敏感率较低，仅22.22%，但对其他几种抗菌药物敏感率较高。

综上所述，应加强临床对抗菌药物的规范化管理，临床医生在治疗宫颈炎时，应根据实验室的药敏试验结果，合理选择抗菌药物，针对性治疗，以达到预期的治疗效果。

参考文献：

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[4]谢婧,焉彩霞,刘志敏.复发性自然流产患者宫颈分泌物中生殖支原体与解脲脲原体的检测及临床意义[J].当代医学,2016,22(10):48-49.

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[7]李影林.临床医学检验手册[M].长春:吉林科学技术出版社,1987:673,675.

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