有研究表明，在全球疾病的病死率中慢性阻塞性肺疾病(COPD)居于第4位，病死率仅次于心脏病、恶性肿瘤、脑血管疾病，现已成为导致人类死亡的重要原因之一[1]。既往有研究表明，COPD的发生、发展与炎症级联反应有关，持续性的炎症反应刺激是导致COPD患者肺功能减退的重要原因之一[2-3]。D-二聚体(D-D)是评估机体纤溶、凝血异常的常用指标，近年来被用于COPD的诊断中，D-D水平升高会促进肺功能衰退[4]。近年来，微小RNA(miR)成为临床研究的热点与重点，miR参与了多种肺部疾病炎症反应调节，具有负性调控炎症因子分泌的作用[5]。基于此，本研究探讨D-D、降钙素原(PCT)、miR-146a在COPD患者中的水平及意义，现报道如下。

1、资料与方法

1.1一般资料

选取2021年1月至2023年1月本院接诊的120例COPD患者作为COPD组，另选取同期本院门诊中心的120例健康体检者作为对照组。纳入标准：(1)COPD组均符合《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2021年修订版)》[6]中COPD的诊断标准；(2)年龄>40岁；(3)生命体征平稳，神志清楚，可配合医生完成本研究；(4)既往无肺部手术史；(5)检查前未接受过肺泡灌洗等对症治疗。排除标准：(1)合并肺癌等恶性肿瘤者；(2)合并支气管哮喘、支气管扩张症等呼吸系统疾病者；(3)合并全身严重感染性疾病者；(4)合并艾滋病等传染性疾病者；(5)同期参与其他研究者；(6)合并血液疾病者；(7)近1个月内存在免疫抑制剂治疗史者。COPD组中男70例，女50例；年龄52～80岁，平均(66.28±5.04)岁；病程5～13年，平均(9.82±1.07)年。对照组中男68例，女52例；年龄55～79岁，平均(66.34±5.01)岁。两组性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。根据发作程度将COPD组又分为急性加重期组和稳定期组，急性加重期指患者呼吸道症状恶化，导致额外治疗[6]。急性加重期组40例，男21例，女19例；年龄60～80岁，平均(68.22±4.02)岁。稳定期组80例，男46例，女34例；年龄52～76岁，平均(64.03.28±5.06)岁。本研究经本院医学伦理委员会审核批准(202002901)。所有研究对象均知情同意并签署知情同意书。

1.2方法

(1)D-D检测：采集所有研究对象2 mL抗凝静脉血，以3 000 r/min离心15 min,采用沃芬全自动凝血分析仪[厂家：沃芬医疗器械(嘉兴)有限公司，型号：ACL TOP750]检测血浆D-D水平。(2)PCT检测：采集所有研究对象3 mL空腹静脉血，以4 000 r/min离心10min,将上层血清分离后放置在-80℃冰箱待检，采用全自动电化学发光分析仪[厂家：深圳普门科技股份有限公司，型号：ECL8000]检测血清PCT水平。(3)miR-146a检测：采集所有研究对象5 mL空腹静脉血，以3 000 r/min离心处理10 min后置于-80℃冰箱待检，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-146a水平。提取RNA样本1μL,采用紫外分光光度计对RNA的浓度进行检测，其为1.8～2.1。在95℃环境预热3 min,而后分别在95、60、72℃环境孵育30、30、15 s,共35个循环，最后在72℃环境孵育5 min终止反应，采用2-ΔΔCt法计算miR-146a水平。miR-146a正、反向引物序列分别为5′-TACTGGGAAGTGGACACTA-3′、5′-CTTGACCATGTGCCATFC-3′,miR-146a U6内参基因正、反向引物序列分别为5′-GCACCGTCAAGGCTGAGAAC-3′、5′-TGGTGAAGACGCCAGTGGA-3′。所有检测试剂盒均购自江苏英科新创医学科技有限公司，所有操作严格按照实验室操作规程和试剂说明书完成。(4)改良呼吸困难指数(mMRC)评分：剧烈活动后无呼吸困难症状为0级(记1分),上缓坡或快速行走时会出现呼吸困难症状为1级(记1分),行走速度慢于同龄人为2级(记2分),行走100 m后需要休息或者平地行走数分钟需要休息为3级(记3分),轻微活动就会出现呼吸困难症状为4级(记4分)。分值越高表明呼吸困难程度越重。

1.3观察指标

比较COPD组和对照组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分。比较稳定期组和急性加重期组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分。预后良好判定标准：经对症治疗后缺氧、呼吸困难、咳嗽等症状明显减轻，康复出院，随访1个月仍生存且未发生相关并发症；预后不良判定标准：随访1个月缺氧、呼吸困难、咳嗽等症状无改善，甚至并发呼吸机相关性肺炎或死亡[7]。根据预后情况将COPD组又分为预后良好组和预后不良组。比较预后良好组和预后不良组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分。

1.4统计学处理

采用SPSS26.0统计软件进行数据分析处理。符合正态分布的计量资料以

表示，两组间比较采用独立样本t检验；计数资料以例数表示，组间比较采用χ2检验；采用Pearson相关分析COPD患者D-D、PCT、miR-146a水平与mMRC评分的相关性。以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结 果

2.1 COPD组和对照组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分比较

COPD组D-D、PCT水平及mMRC评分均高于对照组，miR-146a水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2稳定期组和急性加重期组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分比较

急性加重期组D-D、PCT水平及mMRC评分均高于稳定期组，miR-146a水平低于稳定期组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3预后良好组和预后不良组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分比较

预后不良组12例，预后良好组108例。预后不良组D-D、PCT水平及mMRC评分均高于预后良好组，miR-146a水平低于预后良好组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表1COPD组和对照组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分比较

表2稳定期组和急性加重期组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分比较

表3预后良好组和预后不良组D-D、PCT、miR-146a水平及mMRC评分比较

2.4 COPD患者D-D、PCT、miR-146a水平与mMRC评分的相关性

Pearson相关分析结果显示，COPD患者D-D、PCT水平与mMRC评分均呈正相关(P<0.05),miR-146a水平与mMRC评分呈负相关(P<0.05)。见表4。

表4COPD患者D-D、PCT、miR-146a水平与mMRC评分的相关性

3、讨 论

COPD具有反复发作、高发病率、进行性进展等特点，肺部疾病、病毒感染、吸入过敏颗粒、温度变化、空气污染等均为诱发COPD的危险因素[8]。COPD患者普遍存在呼吸困难、气虚、咳痰、胸闷等，如果得不到及时、有效的治疗容易引发肺栓塞、肺部感染、呼吸衰竭等并发症，可威胁患者的生命安全[9]。COPD发病期间中性粒细胞、T淋巴细胞等会被激活，释放大量白细胞介素(IL)、单核细胞趋化因子等炎症因子，引发炎症级联反应，导致肺功能进行性衰退，对其预后造成严重不良影响[10-11]。由此可见，炎症反应仍然是诱发或促进COPD进展的核心机制。

D-D是目前评估凝血功能的常用指标，一旦血浆D-D水平升高，提示机体纤溶、凝血系统被激活，机体可能处于高凝或血栓状态，发生急性肺栓塞的风险较高[12]。PCT是评估机体炎症反应的常见促炎性细胞因子，机体受到炎症反应刺激或创伤时血浆PCT水平会升高[13]。有学者认为，PCT可能通过调节炎症反应相关的信号通路并参与COPD急性加重期的炎症反应[14]。miR-146a是miR的重要家族成员，位于5q34,由miR-146加工而成，通过负反馈调节的形式抑制IL-6等炎症介质释放[15-16]。本研究结果显示，COPD组D-D、PCT水平及mMRC评分均高于对照组，miR-146a水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05),说明COPD患者与健康体检者比较，D-D、PCT水平相对较高，而miR-146a水平会降低。张星星等[17]研究表明，COPD组miR-146a水平为0.53±0.27,低于对照组的1.00±0.82,接近本研究结果，验证了miR-146a属于抗炎性细胞因子，具有抗炎作用，可作为临床诊治COPD的新靶点。

本研究结果显示，急性加重期组血浆D-D、PCT水平及mMRC评分均高于稳定期组，miR-146a水平低于稳定期组，差异均有统计学意义(P<0.05),说明COPD患者病情急性发作时D-D、PCT水平会上调，而miR-146a水平会降低，呼吸困难程度会加重。miR-146a在COPD患者病情恶化、进展过程中，对炎症反应通路的调节作用会减弱。当miR-146a水平下调，淋巴细胞、内皮细胞、中性粒细胞、上皮细胞的趋化因子受体均会被激活，从而引发纤溶亢进、免疫损伤等，D-D水平升高，介导炎症级联应激反应[18-20]。本研究结果显示，预后不良组D-D、PCT水平及mMRC评分均高于预后良好组，miR-146a水平低于预后良好组，差异均有统计学意义(P<0.05),说明可将D-D、PCT水平持续性升高，miR-146a水平降低作为COPD患者病情恶化、预后不良的标志。本研究结果显示，COPD患者D-D、PCT水平与mMRC评分均呈正相关(P<0.05),miR-146a水平与mMRC评分呈负相关(P<0.05),说明可通过检测D-D、PCT、miR-146a水平，对患者预后进行预测及判断，从而指导临床医生根据个体差异及时调整治疗方案，最大限度地改善患者预后，其中D-D、PCT水平升高，miR-146a水平降低，意味着呼吸困难程度加重。包东亮等[21]研究表明，呼吸衰竭的COPD组PCT水平为(6.72±1.45)ng/mL,高于非呼吸衰竭组的(4.15±1.22)ng/mL,验证了病情恶化、加重的COPD患者PCT水平相对较高。

本研究的局限性存在于多个方面：纳入的样本量偏少，属于回顾性研究，挑选研究样本时存在偏倚，且病例收集及随访时间跨度较短，这些因素可能会对本研究结果普遍性和代表性产生一定影响。因此，后续研究需进一步增加临床样本量，延长病例随访时间，联合多部门对大数据进行前瞻性研究，为评估D-D、PCT、miR-146a在COPD患者病情诊治、预后判断中的临床价值提供更多参考依据。

综上所述，COPD患者D-D、PCT水平及mMRC评分相对较高，miR-146a水平相对较低，且随着病情恶化或预后不良，D-D、PCT水平及mMRC评分会逐渐升高，而miR-146a水平会逐渐降低。D-D、PCT、miR-146a水平与mMRC评分均存在一定相关性，可通过动态监测以上指标，评估患者的疾病进展程度及预后。

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基金资助:江苏省连云港市卫生健康委员会指导性课题(ZD202206);

文章来源:章勇,薄维波,李静.慢性阻塞性肺疾病患者D-D､PCT､miR-146a水平及意义[J].检验医学与临床,2024,21(22):3275-3278+3285.