摘要:目的:了解河源地区儿童呼吸道病毒感染情况。方法:采集5530例呼吸道疾病住院患儿鼻咽拭子,用直接免疫荧光法检测7种呼吸道病毒抗原(副流感病毒PIV1-3、呼吸道合胞病毒RSV、流感病毒FA/FB、腺病毒ADV)。结果:呼吸道病毒检出阳性率为24.6%,单一、混合病毒阳性率分别为23.0%、1.6%。婴儿组病毒感染率最高,主要为RSV感染;ADV感染多见于学龄前期和学龄期儿童。毛细支气管炎的病毒检出率(51.8%)最高。春夏季病毒检出率低于秋冬季病毒感染率(P<0.01)。结论:秋冬季是河源地区呼吸道病毒高发季节,RSV是住院婴幼儿呼吸道感染的主要病原体。
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急性呼吸道感染是儿科最常见的疾病之一,90%以上是由病毒感染导致,可通过飞沫传播,不同的地区、季节、年份及年龄均可存在差异[1,2]。儿童急性呼吸道感染最常见的病毒分别为3型副流感病毒(PIV1、PIV2和PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)、2型流感病毒(FA和FB)和腺病毒(ADV)。为了解本地区儿童常见呼吸道病毒病原学的构成情况,本文回顾性分析了河源市妇幼保健院儿科因呼吸道感染性疾病住院患儿呼吸道病原学的检测结果,旨在为疾病的临床诊治提供参考依据。
1、资料和方法
1.1临床资料
收集2016年9月-2019年8月在河源市妇幼保健院因呼吸道感染住院的患儿5530例7项呼吸道病毒检测的结果,其中男3413例,女2117例。按年龄分为4组:婴儿组(1月~)2512例,幼儿组(1岁~)1741例,学龄前组(3岁~)1048例,学龄组(6岁~)229例;按季节分为春季(3~5月)1565例,夏季(6~8月)1446例,秋季(9~11月)1326例,冬季(12月~次年2月)1193例。依据《诸福棠实用儿科学》第8版[3]中呼吸道疾病的诊断标准,入组病例均符合以下条件:(1)病程在2周以内;(2)急性呼吸道感染症状之一:鼻塞、流涕、发热、咽痛、咳嗽、咳痰等。
1.2方法
1.2.1标本采集
入院时经由本科室护士(已进行专业培训)按操作流程在患儿鼻咽部用尼绒植绒拭子采集标本,并在1h内送实验室进行病原检测。在200倍视野下,单孔样本中的柱状上皮细胞数达20个以上为合格样本,60个以上则为高质量样本。
1.2.2标本检测
采用美国DiagnositicHybridsInc.提供的7项呼吸道病毒检测试剂盒(免疫荧光法),在患儿鼻咽脱落细胞中分别检测PIV1、PIV2、PIV3、RSV、FA、FB、ADV7种病毒抗原,操作过程严格按照试剂说明书进行。在放大200倍时,以每视野多于2个完整细胞内有明亮的果绿色荧光为阳性,否则为阴性,使用莱卡荧光显微镜(DM500)观察检测结果。
1.3统计学处理
采用SPSS19.0进行统计分析,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
2.1呼吸道病毒总体检出结果
5530例标本中检出阳性标本1359例(24.6%),单一病毒感染1269例,混合感染90例。RSV检出率最高为17.3%,其次分别为PIV3(2.2%)、ADV(1.7%)、混合感染(1.6%)、FA(0.9%)、PIV1(0.6%)、FB(0.2%)、PIV2(0.1%)。混合感染中,76例感染2种病毒,10例感染3种病毒,4例感染4种病毒;RSV合并其他病毒感染有65例,占混合感染的72.2%(65/90)。
2.2不同性别呼吸道病毒检出结果
5530例患儿中,呼吸道病毒的男女检出率差异无统计学意义(P>0.05);不同病毒在男女间的检出率差异亦无统计学意义(P>0.05)。见表1。
2.3不同年龄患儿呼吸道病毒的检出结果
病毒检出率在不同年龄组间差异有统计学意义(P<0.01)。婴、幼儿组的总体病毒检出率高于学龄前组和学龄组,RSV、PIV3在婴幼儿期感染率较高,ADV则更易感染学龄前期和学龄期儿童(P<0.01);PIV1、PIV2、FA、FB和混合感染在不同年龄组间差异无统计意义(P>0.05)。见表2。
2.4不同临床诊断呼吸道病毒的检出结果
不同疾病呼吸道病毒的检出率差异有统计学意义(P<0.01)。毛细支气管炎病毒检出率最高,RSV是下呼吸道感染的主要病原体,FA在急性上呼吸道感染中多见,PIV3多见于下呼吸道感染,PIV1多见于喘息性支气管炎。PIV2、FB和混合感染的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。
2.5不同季节呼吸道病毒检出的结果
不同季节呼吸道病毒检出情况不同,秋季病毒感染率最高,冬季次之,春季病毒感染率最低(P<0.01)。RSV在全年均有较高阳性率,秋季更活跃。FB在冬春季更常见,混合感染在夏秋季节多见,ADV感染在夏季最明显,PIV无明显季节流行特征。见表4。
表1呼吸道病毒检出结果与性别的关系
表2呼吸道病毒检出结果与年龄的关系
表3呼吸道病毒检出结果与疾病的关系
表4呼吸道病毒检出结果与季节的关系
3、讨论
儿童呼吸道感染的病原体包括病毒、细菌、非典型微生物等,病毒感染是重要原因之一,<2岁婴幼儿病毒性病原引起呼吸道感染占80%~90%。不同病原感染引起临床症状没有特异性,但治疗方案却不尽相同。轻症病毒感染可自限,但重症病毒感染可能危及患儿生命。全球每年约有150万儿童因呼吸道感染而导致死亡[4],因此尽快明确病原体对临床诊治意义重大。免疫荧光法检测鼻咽部脱落细胞中的病毒抗原,是目前临床最常用的可靠方法,可用于早期快速病原诊断,能有效避免抗生素的滥用[5,6]。但该检测方法存在一定缺陷:标本采集需要在患儿鼻咽部进行,配合度较差,可能出现采集量少导致假阴性结果。而非特异性荧光显色在实验室操作过程中因冲洗不干净亦可导致假阳性结果。但是,该项目对实验室设备和人员要求不高,费用相对低廉,耗时短,灵敏度和特异度均较高,适宜在基层医院使用。
本研究的5530例样本均来源于河源市妇幼保健院儿科住院部,呼吸道病毒检出率为24.6%,与中山23.25%[7]大致相同,低于沈阳的28.31%[8],高于武汉的19.2%[9]。RSV阳性率最高为17.3%,与我国其他地区报道基本一致[7,8,9,10],表明RSV是河源地区儿童呼吸道病毒感染的主要病原体。
资料显示儿童呼吸道病毒的混合感染率为1%~40%[11,12],与临床症状是否存在关联尚有争议。本组资料中混合感染率为1.6%,主要是RSV合并其他病毒感染,夏秋季节及婴幼儿中多见,不同疾病的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。
本结果中,婴儿组至学龄组呼吸道病毒检出率分别为31.3%、23.4%、14.8%、5.2%,提示婴幼儿是呼吸道病毒感染的高发人群,可能与婴幼儿呼吸系统和免疫系统功能低下,母传抗体逐渐消失有关[13]。随着年龄增长,各器官功能逐渐发育成熟,学龄儿童对病毒的易感性逐渐下降。资料显示约90%儿童在2岁之前感染过RSV,约40%的RSV会感染下呼吸道,少数引起严重后果[14]。在我院住院儿童中,RSV在下呼吸道疾病中的检出率为16.0%~46.7%,婴儿组和幼儿组检出率为24.6%、15.6%,提示本地区下呼吸道病毒感染的主要病原体是RSV,是婴幼儿病毒性呼吸道感染住院的首要因素,与池细俤等[15]报道的一致。约95%儿童5岁时已有RSV抗体[16],年长儿RSV感染率下降,本组学龄前和学龄组儿童感染率只有6.3%、0.9%。ADV感染在学龄前及学龄儿童多见,与魏洁等[2]报道相同。临床医生应重点了解不同年龄病毒感染特点,做到早诊断,早治疗。
本组呼吸道病毒检出率秋冬季高于春夏季节,可能与河源地处山区,秋冬季节昼夜温差大,气候多变有关。急性上呼吸道感染的病毒检出率不高,考虑与入组病例均为住院儿童,未能将鼻病毒、人偏肺病毒等纳入检测有关。ADV在春夏季节高发,与孙惠泉等[17]报道一致。PIV全年均有散发流行。季节的变更导致病毒感染的类型有所不同,应关注不同病毒在不同季节的流行情况。
综上所述,秋冬季节是本地区呼吸道病毒感染的高发季节,RSV是我院住院患儿最常见的呼吸道病毒,婴幼儿多发。7项呼吸道病毒检测为本地区呼吸道疾病早期诊治提供依据,指导临床合理用药,避免滥用抗生素。
参考文献:
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