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MTHFR基因多态性及血清AFP水平与胎儿神经管畸形的关系

2024-09-29 15 上传者：管理员

摘要：目的分析亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性及血清甲胎蛋白(AFP)与胎儿神经管畸形的关系。方法选取2018年1月至2023年11月在陕西省宝鸡市妇幼保健院引产或分娩的50例胎儿神经管畸形产妇作为观察组，另选取150例胎儿健康产妇作为对照组。比较两组MTHFR基因多态性分布情况及血清AFP水平，比较观察组不同MTHFR基因多态性血清AFP水平，采用多因素Logistic回归分析胎儿神经管畸形的危险因素。结果观察组MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型比例及血清AFP水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型产妇血清AFP水平高于CC基因型，MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型产妇血清AFP水平高于AA基因型，差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示，MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型是发生胎儿神经管畸形的危险因素(P<0.05)。结论 MTHFR C677T基因、MTHFR A1298C基因多态性及血清AFP水平与胎儿神经管畸形有关，在预测胎儿神经管畸形方面有一定应用价值。

关键词：
亚甲基四氢叶酸还原酶基因
多态性
甲胎蛋白
畸胎
胎儿神经管畸形
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神经管畸形是一种常见的出生缺陷类型，可导致畸胎、死胎等，给家庭带来沉重负担[1-2]。因此，尽早筛查神经管畸形对于优生优育的意义重大。临床常使用影像学检查、生物化学指标检测等诊断胎儿神经管畸形[3-4]。血清甲胎蛋白(AFP)检测常用于筛查神经管畸形，具有无创、简便的特点[5-6]。临床发现，胎儿神经管畸形的发生与叶酸代谢障碍有关，叶酸不足会增加胎儿神经管畸形发生风险[7]。亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)被认为参与了叶酸代谢过程，其基因多态性可影响同型半胱氨酸代谢过程，可对胎盘血管性疾病的发生、发展产生影响[8-9]。基于此，本研究分析了AFP、MTHFR基因多态性与胎儿神经管畸形发生风险的关系。现报道如下。

1、资料与方法

1.1一般资料

选取2018年1月至2023年11月在陕西省宝鸡市妇幼保健院引产或分娩的50例胎儿神经管畸形产妇作为观察组，另选取150例胎儿健康产妇作为对照组。观察组平均(26.10±4.11)岁；平均孕周为(18.05±1.02)周；初产妇26例，经产妇24例。对照组平均(25.97±4.06)岁；平均孕周为(17.95±1.00)周；初产妇91例，经产妇59例。对照组和观察组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05),有可比性。纳入标准：(1)单胎妊娠；(2)孕15～20+6周；(3)接受了MTHFR基因、血清AFP检查；(4)临床资料完整；(5)存在胎儿神经管畸形。排除标准：(1)合并恶性肿瘤、血液病等其他严重疾病；(2)非正常受孕；(3)有精神障碍。

1.2方法

采集受试者空腹静脉血2 mL,根据试剂盒提取MTHFR基因组DNA,测得其浓度合格后进行后续试验。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测C677T、A1298C位点的单核苷酸多态性分布。配制10.0μL的反应体系：1.0μL 20 mg/L的DNA模板，5.0μL的TaqMan Universal PCR Master Mix, 0.5μL的Taqman-MGB探针，3.5μL的超纯水。反应条件：95℃,10 min; 92℃,15 s; 60℃,1 min。进行23个循环。在89℃环境中变性15 s;最后在60℃的环境下延伸90 s,共进行30个循环。采集受试者外周静脉血标本3 mL,以2 500 r/min离心15 min,分离血清，使用罗氏2010型全自动电化学发光仪检测AFP水平。

1.3统计学处理

采用SPSS22.0统计软件分析数据。符合正态分布的计量资料以表示，两组间比较采用独立样本t检验；计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验；采用多因素Logistic回归分析胎儿神经管畸形的危险因素。以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1两组MTHFR基因多态性分布情况比较

观察组MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型比例高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1两组MTHFR基因多态性分布情况比较[n(%)]

2.2两组血清AFP水平比较

观察组血清AFP为(2.20±0.78)MOM,明显高于对照组的(1.81±0.66)MOM(P<0.05)。

2.3观察组不同MTHFR基因多态性血清AFP水平比较

观察组MTHFR C677T基因CC基因型有11例，CT基因型+TT基因型有39例；MTHFR A1298C基因AA基因型有21例，AC基因型+CC基因型有29例。观察组MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型产妇血清AFP水平[(2.30±0.60)MOM]高于CC基因型[(1.82±0.55)MOM],差异有统计学意义(t=-2.383,P=0.021);观察组MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型产妇血清AFP水平[(2.39±0.48)MOM]高于AA基因型[(1.94±0.52)MOM],差异有统计学意义(t=-3.160,P=0.003)。

2.4胎儿神经管畸形的多因素Logistic回归分析

将MTHFR C677T基因(CT基因型+TT基因型=1,CC基因型=0)、MTHFR A1298C基因(AC基因型+CC基因型=1,AA基因型=0)、AFP(原值输入)作为自变量，是否胎儿神经管畸形(是=1,否=0)作为因变量进行多因素Logistic回归分析，结果显示：MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型是发生胎儿神经管畸形的危险因素(P<0.05)。见表2。

表2胎儿神经管畸形的多因素Logistic回归分析

3、讨论

神经管畸形是由神经管上皮细胞分化紊乱导致的出生缺陷畸形，与遗传、环境等多种因素有关[10]。近年来，叶酸代谢体系中相关酶的基因多态性与神经管畸形的关系受到了临床的关注[11]。

有研究表明，MTHFR基因突变会降低酶活性，影响甲基供体生成，造成机体内的同型半胱氨酸大量蓄积，导致胚胎发育异常[12-13]。本研究结果显示，观察组MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型比例高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05),说明上述位点的基因多态性可能参与胎儿神经管畸形发生过程并会影响叶酸在体内转化为有效形式的过程，叶酸作为DNA合成与甲基化的基石，对神经管闭合至关重要[14-15]。叶酸代谢的紊乱将引发DNA甲基化异常，干扰基因表达，进而提升神经管畸形的风险。C677T与A1298C作为MTHFR基因上的重要多态性变异，已被深入研究并确认与叶酸代谢效率紧密相关[16]。尤其是C677T位点的TT基因型变异，常导致MTHFR酶活性大幅度下降，阻碍叶酸转化，促使同型半胱氨酸堆积。MTHFR A1298C基因发生突变时，AC基因型+CC基因型比例较大会影响蛋氨酸合成酶与MTHFR的结合，降低叶酸水平，为神经管畸形的发生提供条件[17],A1298C变异虽单独作用时影响有限，但若与C677T变异并存，则可能进一步恶化叶酸代谢状况。结合本研究结果进行分析，携带MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型的孕妇，其叶酸代谢效率较低，更易陷入叶酸不足的境地，从而增加了胎儿罹患神经管畸形的可能性。

AFP由胎儿卵黄囊及肝脏合成[18-19]。本研究结果显示，观察组血清AFP水平高于对照组(P<0.05),提示血清AFP水平与胎儿神经管畸形发生相关，与LI等[20]研究结果一致。分析原因为神经管缺损的胎儿某些部位缺乏组织覆盖，AFP大量渗漏至母体外周循环，从而导致母体AFP水平升高。

进一步研究发现，观察组MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型产妇血清AFP水平高于CC基因型(P<0.05);观察组MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型产妇血清AFP水平高于AA基因型(P=0.003),提示外周血MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型母体的AFP水平升高可能提示存在胎儿神经管畸形。分析原因为MTHFR基因突变会影响DNA甲基化程度、稳定性及染色体的正常分离，参与神经管畸形的发生，而神经管畸形胎儿肝脏及卵黄囊可合成AFP,并且脑组织或脊髓显露，导致AFP大量渗漏至母体外周循环，使得母体AFP水平升高。

多因素Logistic回归分析结果显示：MTHFR C677T基因CT基因型+TT基因型、MTHFR A1298C基因AC基因型+CC基因型是发生胎儿神经管畸形的危险因素(P<0.05),这强调了MTHFR在叶酸代谢中的核心角色，其变异导致叶酸转化效率下降及同型半胱氨酸代谢异常，扰乱DNA甲基化和基因调控，影响胎儿神经系统的健康发育。因此，针对携带这些基因型的孕妇，强化叶酸补充与监测措施，对于有效预防胎儿神经管畸形至关重要。

本研究将AFP及MTHFR基因多态性结合分析，为临床筛查有神经管畸形胎儿提供依据。但本研究纳入的样本量较少，且来源于单中心，所以试验结果可能存在偏倚，今后需要扩大样本量，进行多中心研究。

综上所述，MTHFRC677T、MTHFRC A1298C基因多态性及外周血AFP水平与胎儿神经管畸形有关，在预测胎儿神经管畸形方面有一定应用价值。

参考文献:

[7]钱芳,纵瑞奇,王军,等.孕期个性化补充叶酸对新疆地区新生儿出生缺陷的影响[J].中国优生与遗传杂志,2022,30(9):1531-1535.

[8]张锦阳,孙莉丽,迟祥,等.基于盘锦地区259例孕妇MTHFR基因多态性与不良妊娠结局相关性分析[J].中国计划生育学杂志,2022,30(3):601-604.

[9]滕俊萍,索峰,张燕,等.育龄女性亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性研究[J].罕少疾病杂志,2023,30(7):6-7.

[10]淑芳,周美,王冰斌,等.母体糖尿病诱导胚胎神经管畸形的分子机制和治疗研究进展[J].中国细胞生物学学报,2022,44(12):2335-2344.

[13]郑媛珂.不良妊娠结局与叶酸代谢相关基因多态性及孕中期血清学产前筛查的关系[D].郑州:郑州大学,2021.

[14]呼改琴,邱洪涛,侯爱琴.MS,MTHFR,MTRR基因多态性与胎儿缺陷相关性研究[J].中国优生与遗传杂志,2020,28(1):7-9.

基金资助:陕西省宝鸡市卫生健康委员会计划立项课题(2019-47);

文章来源:权秋宁,屈萍,罗少龙,等.MTHFR基因多态性及血清AFP水平与胎儿神经管畸形的关系[J].检验医学与临床,2024,21(18):2737-2740.