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遗传工程列表
基因工程是20世纪70年代诞生的一门新兴学科,主要是通过切、连、转、筛和产这五个步骤,将供体细胞中的遗传物质进行体外重组改造,而后转入受体细胞中,赋予受体细胞崭新的性状。基因工程融合了生物化学、分子生物学、蛋白质工程等多学科的理论基础,是一门实用性强的工具学科,其相关技术已经广泛渗透到医药、食品、化工、农业以及能源等领域。
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基因精准表达是细胞和个体维持正常生命活动的前提,而基因组染色质三维结构是基因精准表达调控的结构基础[1]。哺乳动物细胞内长约2m的DNA分子,以高度折叠浓缩成染色质的方式存储于直径大约8μm的细胞核内,形成复杂有序的三维结构,使得在线性基因组上相距很远的基因表达调控元件与其靶基因在三维空间上充分接近,从而发挥功能元件的精细调控作用[2,3]。
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多不饱和脂肪酸(PUFAs)是人体必需脂肪酸,主要包括n-3PUFAs和n-6PUFAs。其中,n-3PUFAs在自然界中分布广泛,是动物脂质代谢的重要组成部分,在人类饮食和生理中发挥着重要作用。与人体生理相关的3种类型n-3PUFAs中,α-亚油酸(ALA)来自植物,二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)常见于深海鱼油中[1]。
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经过一年的教学实践,从获得的数据和学生的总结来看,对分课堂教学模式中过程性评价学生学习效果是可行的,加强对学生学习的形成性评价,有明显的教学效果,培养了学生学习习惯,锻炼了学生学习能力。结合教学改革工作,进行课程过程性考核管理,做到线上有资源、课堂有活动、考核有评估。将学习通平台融入到课程过程性考核中,取得了良好的效果。
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本文提出的基于中值的JS散度可变剪接差异分析方法具有简单、计算复杂度低的优点,可以方便地找寻到在可变剪接整体上发生显著变化的可变剪接紊乱基因。且结果表明:与基于单个异构体的差异分析相比,本文提出的差异分析方法能够发现大量在单个异构体表达差异不显著,但在整体分布上具有显著差异的基因,为进一步研究可变剪接差异与癌症的关系奠定了基础。
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自20世纪80年代后,出现了一系列基于同源重组的基因组靶向修饰技术,之后又出现了锌指核酸酶技术、类转录激活因子核酸酶技术和成簇规律间隔短回文重复)技术[15,16,17]。上述基因改造技术已广泛应用于大肠杆菌、酿酒酵母等模式微生物[18,19]。乳酸菌基因编辑方面的应用略少,但也有了一定程度的发展[20,21]。
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作为国际合成生物界共同的课题,本次获奖科研团队完成了酵母四条人工染色体的科学研究,其科研成果被Nature、Science等亮点评述为“是定位缺陷靶点的标准方法”,被合成首个原核基因组的知名学者Gibson评价为“可作为理解人类疾病的模型”,更被美国两院院士Church评价为“令人耳目一新”。
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CRISPR/Cas9基因编辑技术从细菌抵御外来噬菌体和质粒入侵的免疫防御机制演变而来[11]。与锌指核酸内切酶和类转录激活因子效应物核酸酶等经典的基因打靶技术相比,CRISPR/Cas9具有操作简单、精确高效和制备周期短等优点[12]。为了进一步研究E-钙黏蛋白表达与肿瘤免疫治疗之间的关系,我们在本实验中采用CRISPR/Cas9技术构建CDH1基因敲除的MCF-7细胞系,为后续研究奠定基础。
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本项目从大肠杆菌基因组中克隆出糖酵解途径及三羧酸循环中启动子序列,用红色荧光蛋白mCherry作为报告基因来检测这些启动子的强度,并进行启动子序列分析。同时用筛选的强启动子来表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和丙酮酸激酶,考察这些基因对大肠杆菌柠檬酸合成的影响,结果表明柠檬酸产量都大幅度提高。这些不同强度的启动子为大肠杆菌的代谢工程、合成生物学研究和细胞工厂设计奠定基础。
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磷脂酰肌醇代谢是一个重要的细胞内信号系统,参与多种细胞功能,包括激素分泌、神经递质传递、生长因子信号、细胞膜运输和细胞骨架调节等。磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C是该系统中的关键酶,水解磷脂酰肌醇4,5-二磷酸[PI(4,5)P2]生成肌醇1,4,5-三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)2个第二信使,以响应激素、神经递质、生长因子激活受体和其他分子。
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本文在此基础上制备以POSS为骨架的星型阳离子聚合物POSS-(PDMAEMA)8(缩写为PPD),在阳离子聚合物末端接枝梳状PEGMA引入双键,将CREDVW(Cys-ArgGlu-As-Val-Trp)多肽键接在PPD阳离子聚合物末端,最终制备得到POSS-(PDMAEMA)8-PPEGMA-CREDVW(缩写为PPD-CREDVW)阳离子聚合物.
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1990年启动,耗时14年由6个国家合作完成的人类基因组计划细致地绘制了人类的基因图谱,提供了近30亿个碱基对和约2万~2.5万个蛋白质编码基因的信息[1,2].HGP的实施和完成不仅为生命科学研究提供了详细的遗传信息,而且也为基因组测序技术的发展带来了机遇,使其在随后的岁月中得到了迅猛的发展。
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“后人类”话语产生于20世纪60年代,最初以艺术想象方式做绘画、影视、文学创作,同时又对所创造的作品予以艺术理论或文化社会学的解读;与其相伴随的另一种方式是理论预见,它通过对后人类社会现象的把握预测其走向和未来。然而,无论艺术想象方式还是理论预见方式,都为人类向后人类演进的进程所激励。
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我们对T1代转基因阳性植株进行分子鉴定,鉴定结果进行统计分析后得到的CRISPR/Cas9基因编辑效率为3.7%~15.4%。但对T2代种子的脂肪酸组分进行分析,通过脂肪酸组分的变化得到的CRISPR/Cas9基因编辑效率为54.5%~74.1%。由此我们发现,通过分析脂肪酸组分变化来检测CRISPR/Cas9基因编辑突变体的方法漏检率更低,结果更准确,方法更具优越性。
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目的基因导入并表达于真核细胞是确定目的基因生物学活性的必要方法之一,目前常用的目的基因导入方法有电穿孔、病毒介导转染和脂质体转染等[1]。其中,脂质体转染因操作简单且不需要特殊仪器设备而被广泛接受[2]。转染时,不管实际使用的目的基因如何,转染试剂说明书给出的方法都是相同的。
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