首页 > 论文范文 > 农业科技论文 > 畜牧综合论文 > 家禽养殖论文 > 鸭圆环病毒病研究进展

鸭圆环病毒病研究进展

2023-11-13 331 上传者：管理员

摘要：近年来，鸭圆环病毒引起的鸭圆环病毒病对我国养鸭业危害严重。本文主要从病原学特征、基因组结构、致病机制、流行病学、临床症状、病理特征、诊断以及综合防治措施方面对鸭圆环病毒病进行了综述，以期为鸭圆环病毒病的研究方向和科学防治提供参考和借鉴。

关键词：
灭活疫苗
科学防治
综合防控
诊断
鸭圆环病毒病
加入收藏

1、病原学特征

鸭圆环病毒（Duck circovirus,Du CV）属圆环病毒科中的圆环病毒属，在电子显微镜下其体型和其他圆环病毒差不多，直径在15～16 nm左右，是目前所知的最小的动植物病毒。Du CV没有囊膜，呈现二十面体对称的单股负链DNA结构。研究发现，Du CV-1/2很难在细胞中生长，但有报道称，这种病毒可以在外周血单核细胞（Peripheral blood monolayer cells,PBMC）、胚胎卵和鸭子中繁殖，并开发出了相关灭活疫苗[1]。目前对Du CV病原学特征的研究有限，主要集中在PCR检测和全基因组测序分析2个方面。而未来的研究需要建立更易感的细胞系，优化培养条件，使该病毒的体外培养更加稳定可重复。

1.1 鸭圆环病毒的基因组结构

Du CV的基因组均为单股负链的环状DNA分子，其典型的遗传特点为有3个主要开放阅读框（Rep、Cap、ORF3）、4个基因间重复序列、茎环结构以及滚动圈复制和位于Rep蛋白中的d NTP结合域的保守基序。

1.2 三个主要开放阅读框

3个主要开放的阅读框Rep、Cap、ORF3，其中Rep和Cap编码的蛋白大部分是圆环病毒属的病毒共有的，也是被证实与病毒复制相关的2个蛋白质。Rep基因，即ORF1，编码复制蛋白（replication protein）。Cap基因，即ORF2，编码衣壳蛋白（Capsid protein）。ORF3基因在Rep的互补链上，编码的ORF3蛋白质是一个具有促细胞凋亡活性的病毒蛋白，可能是病毒致病的重要因素之一[2]。

1.3 四个基因间重复序列

通过利用dottup程序进行基组序列解析，发现在Du CV的Rep和Cap 2个ORF的起始密码子之间，出现一个四重串联重复序列（OTR)(CACTTGGGCAG或者CACTTGGCAG)[3]，而此特征并不存在于其他圆环病毒基因组。

1.4 茎环结构以及滚动圈复制和位于Rep蛋白中的d NTP结合域的保守基序列

在ORF1和ORF2的2个起始密码子中间有一段不编码的区段，中间保留着一种保守的碱基顺序（TATTATTAC）的茎环结构。有2个反向重复序列（10 bp的step）在顺序的上游和下游，顺序旁边还有2个正向反复的被看作是和Du CV基因组的滚环拷贝有关的六碱基序列GTACTC(nt11～17和nt18～23）。在茎环结构与Rep基因的起始密码子之间，所对应的nt25～47序列，存在着一个碱基突变或缺失的高突变程度区域[4]。

2、流行病学

目前已知Du CV有3种基因型：Du CV-1、Du CV-2，以及最近在中国湖南省发现的Du CV-3。临床上感染主要是Du CV-1。Du CV-1包含4个子类别Du CV-la、Du CV-1b、Du CV-1c以及新概念的子类别Du CV-1d;Du CV-2分为3种亚型包括Du CV-2a、Du CV-2b、Du CV-2c。关于Du CV-3目前没有过多的报道。Du CV-3于2022年2月在中国湖南省一个农场的成年产蛋鸭中被鉴定出来，其基因组大小为1 755 nt。Du CV-3与Du CV-1/2和鹅圆环病毒（Goose circovirus,Go CV）表现出密切的关系，并与从鸟类和其他动物中鉴定出的其他圆环病毒表现出相当大的距离，表明Du CV-3是一个独立的物种，可能由水禽圆环病毒进化而来，其是否是导致鸭子产蛋量下降的致病性病原体还不得而知[5]。就目前已知来讲，Du CV基因型与宿主品种或地区没有关联的结论[6]。

Du CV于2003年在德国首次发现于羽化紊乱、身体状况不佳且体重较轻的绿头鸭[7]。姜世金首次对中国内地的病死鸭病料进行PCR检测，检测结果确认中国内地存在Du CV感染[8]。随后，该病毒在许多国家被广泛检测到，包括美国、韩国、匈牙利和越南[9]。Du CV感染可能影响免疫系统，导致免疫抑制，并导致更严重的继发感染。同时Du CV普遍存在于番鸭、北京鸭中，许多证据表明，这种病毒可以水平和垂直传播，并可能导致持续感染，导致严重的经济损失[10,11]。

3、致病机理

Du CV的主要特征是宿主诱导的免疫抑制，导致继发性感染或宿主多次感染。禽类感染临床症状的共同特征是生长和发育迟缓，以及明显的背部结痂，羽毛凌乱过程。病毒可能存在于法氏囊、胸腺、肝胆囊、脾脏和肾脏中，其中法氏囊是Du CV的主要生殖器官。Du CV的感染会损害身体的淋巴组织，降低免疫功能，从而降低细胞和体液的免疫功能，增加其他致病感染的可能性。彭艳伶等的研究论文提到，四川省Du CV与鸭大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌（RA）、鸭病毒性肝炎Ⅰ型病毒（DHV）等混感率较高[12]。刘少宁等人研究表明，鸭圆环病毒病和鸭疫里默氏杆菌病或者大肠杆菌等细菌二重感染率达到9.57%[4]。鲁璇等人的研究结果表明，山东地区Du CV的流行主要以Du CV-1为主，德州地区Du CV-1和Du CV-2混合感染严重[13]。研究表明，2020年下半年在山东省内的Du CV和细菌混合感染检出率为86.05%(37/43），新型鹅细小病毒同Du CV在雏鸭体内的共感染均表现出高度的协同性，造成更严重的免疫抑制和组织损伤，进而导致更严重的临床症状[14,15,16,17]。

4、临床症状

感染的鸭子临床特征是发育迟缓、羽毛干燥、呼吸困难、食欲不振以及生长和发育问题。病毒通过呼吸道进入器官后，导致呼吸组织逐渐肿胀，最后由于呼吸道狭窄而造成呼吸困难。感染Du CV的鸭的临床症状主要表现为生长受到抑制或体重出现减轻，羽毛杂乱，羽毛轴出血。

5、病理变化

病死鸭肝脏上发生土黄色斑点，胆汁稀少且明显下降；部分鸭的淋巴细胞严重破坏，炎性细胞大量渗出，法氏囊内的淋巴细胞甲硫氨酸脑啡肽水平显著降低，法氏囊坏死等。有研究成果指出，Du CV在自然的生殖状态下有可能会引起原发性硬化性胆管炎[18]。

6 、诊断

目前，实验室中关于Du CV的检测所使用的方法主要包括多重PCR方法、间接酶联免疫吸附试验（Indirect enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）、环介导等温扩增法（Ring-mediated isothermal amplification,LAMP）、荧光定量PCR、Taq-man探针法、SYBR Green I的双链实时荧光定量PCR技术等。

多重PCR特异性好，灵敏度高，而间接酶联免疫吸附试验则更经济且实用，可进行更大规模治疗与临床检测；环介导等温扩增法可在与核酸等温的情况下，进行快速且直接诊断与检测临床标本。但相较传统的PCR方法来说，荧光定性PCR方法，灵敏度更高、重叠性好、特异率更高、定性更加精确、速率也较快，特别是SYBR Green I的双链实时荧光定性PCR方法，能够通过Tm值识别鸭圆环病毒和小鸭瘟病毒。而除了上述这些技术，核酸探针杂交检验技术也广泛应用于实验室检查中，其检出灵敏度大大不及PCR检验，但是可重复性高和稳定性好[19]。目前有实验室已制备了基于Du CV Cap蛋白单克隆抗体的胶体金抗原检测试纸条，这对于Du CV的基层诊断和筛查工作是非常方便快捷的[20]。

7、综合防控措施

7.1 加强饲养管理

严格科学管理，遵守“预防为主、防重于治”八字方针，遵循全进全出的防疫措施，保证饲喂饲料健康，隔离病鸭，及时处理病死鸭的饲养原则。由于Du CV对外界的物理、化学因素抵御力不强，所以定期对鸭舍进行通风消毒是消灭鸭圆环病毒病的有效措施。此外，需要注意的是种鸭的引进必须经过严格检疫，一定要先隔离再混群。

7.2 药物治疗

目前还没有针对Du CV的防治药物，但有研究表明，利用植物多糖在体内和体外均抑制Du CV诱导的PBMC凋亡且具有抗Du CV活性的原理，感染Du CV后雏鸭前5 d口服16 mg/只·d植物多糖，5 d后8 mg植物多糖，在体内可以提高鸭的免疫能力，促进细胞因子分泌，降低病毒载量，在体外能够减少Du CV引起淋巴细胞凋亡，从而增强免疫系统功能，明显减弱Du CV的感染[21]，其中黄芪多糖、松花粉多糖效果要优于芦荟多糖、无花果叶多糖。也可利用抗病毒类中草药板蓝根10 g、白术3 g、党参5 g、陈皮3 g、黄芪10 g、金银花10 g、苍术5 g、连翘10 g、当归5 g进行治疗[12]。

7.3 疫苗免疫

在还没有获得病毒体外培养方法的前提下，Cap或ORF3的亚单位疫苗或卵黄抗体将成为下一个有效预防鸭圆环病毒病的候选方法。使用在体外PBMC增殖的Du CV灭活后免疫雏鸭，可诱导强大的细胞保护能力，并诱发形成了更高的抗体水平，免疫效应也较好[1]。以含有Cap编码基因的Du CV DNA疫苗免疫，也能够诱发良好的特异性免疫反应，降低鸭群感染Du CV的几率[22]。

8、结语

目前人们对Du CV的发病机制和危害性的了解尚有许多欠缺。由于Du CV尚没有体外培养方式，人们对于它的了解尚十分肤浅。该病是一种十分严峻的免疫抑制性疾病，流行病学研究结果显示，此病已在中国鸭群中普遍存在，它可以降低鸭群的免疫力，使鸭群更易感其他严重的疾病，而且目前在湖南省又发现Du CV-3这种新的血清型，这给养鸭业健康发展带来了更大的挑战。未来应该更深入地研究其发病机制，以期能够更好的防控该病，减少给养鸭业带来的严重危害。

参考文献:

[8]姜世金,张兴晓,刘少宁,等.患传染性浆膜炎发病鸭体内鸭圆环病毒的PCR检测[C]//中国畜牧兽医学会.第15届世界禽病大会､中国畜牧兽医学会2007年学术年会论文集.[出版者不详], 2007:1.

[12]彭艳伶,陈世云,伍天碧,等.鸭圆环病毒感染的诊断及防控[J].四川畜牧兽医, 2022, 49(9):62-63.

[13]鲁璇.死亡鸭胚中四种常见垂直传播性病毒共感染的检测[D].泰安:山东农业大学, 2022.

[14]高攀攀,李玲子,韦良孟,等. 2020年山东省部分地区鸭圆环病毒感染情况分析[J].山东畜牧兽医, 2021, 42(8):1-4.

[15]刘杰.鹅细小病毒与鸭圆环病毒共感染增强致病性研究[D].泰安:山东农业大学, 2019.

[16]李汉卿.新型鹅细小病毒与鸭圆环病毒共感染樱桃谷肉鸭的致病性研究[D].泰安:山东农业大学, 2020.

[19]邹金峰,刘少宁,雷战,等.鸭圆环病毒核酸探针的制备与应用[J].中国兽医学报, 2011, 31(11):1578-1581.

[20]陈思言.鸭圆环病毒Cap蛋白单克隆抗体及免疫胶体金试纸条的研制[D].泰安:山东农业大学, 2022.

[21]王祥锟.四种植物多糖抗鸭圆环病毒病的效果评价[D].泰安:山东农业大学, 2022.

文章来源:李容容,姜世金.鸭圆环病毒病研究进展[J].山东畜牧兽医,2023,44(11):95-98.