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ApoE和SLCO1B1基因指导瑞舒伐他汀调脂的临床研究

2024-11-27 76 上传者：管理员

摘要：目的研究载脂蛋白E（ApoE）基因、溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1（SLCO1B1）基因指导瑞舒伐他汀调脂的有效性及安全性。方法将血脂异常患者根据ApoE基因型分为E2组（ε2/ε2、ε2/ε3）、E3组（ε3/ε3、ε2/ε4）、E4组（ε3/ε4、ε4/ε4）;根据SLCO1B1基因型分为TT组（*1a/*1a、*la/*1b、*lb/*lb）、TC组（*la/*5、*1a/*15、*lb/*15）、CC组（*15/*15）。所有患者均给予瑞舒伐他汀钙片，每次10 mg,每晚1次，口服，持续治疗6个月。比较3组ApoE基因型患者的三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平，比较3组SLCO1B1基因型患者谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、肌酸激酶（CK）、肌酸酐（Cr）、空腹血糖（FBG）和糖化血红蛋白（HbA1C）水平，观察研究期间患者肌痛的发生情况。结果共纳入1 693例患者，其中，E2组204例、E3组1 226例、E4组263例；其中，TT组1 340例、TC组334例、CC组19例。经瑞舒伐他汀治疗后，E2组、E3组、E4组的TG水平分别为（1.34±1.17）、（1.20±0.43）和（1.34±0.55）mmol•L-1,LDL-C水平分别为（1.84±0.52）、（2.09±0.66）和（2.25±0.51）mmol•L-1,HDL-C水平分别为（1.20±0.26）、（1.13±0.27）和（1.01±0.21）mmol•L-1。E2组的TG和LDL-C水平均较E3组和E4组显著下降，E2组和E3组的HDL-C水平均较E4组显著升高（均P<0.05）。经瑞舒伐他汀治疗后，CC组的CK水平均显著高于TT组和TC组(113 vs 96、94 U•L-1,均P<0.05)。TT组、TC组、CC组的肌痛发生率分别为3.13%、5.99%和10.53%,在统计学上差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论经瑞舒伐他汀治疗后，ε2等位基因与E2/E3基因型能够更有效地降低血脂异常患者的TG和LDL-C水平；SLCO1B1 521T>C:CC基因型患者更加容易出现肌痛现象，521T>C各基因型均未导致糖尿病出现。

关键词：
基因多态性
溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1
瑞舒伐他汀钙片
脂异常
载脂蛋白E基因
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动脉粥样硬化血管疾病已成为全球范围内致死亡和致残率较高的疾病[1]。低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)和三酰甘油(triglyceride, TG)与动脉粥样硬化血管疾病发展密切相关[2]。他汀类药物在《中国成人血脂异常防治指南(2016年修订版)》[3]中被定为Ⅰ类推荐药物，然而他汀类药物在调脂效果上存在显著的个体差异，与载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)、溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B1(solute carrier organic anion transporter family member 1B1,SLCO1B1)基因多态性密切相关[4]。《SLCO1B1和ApoE基因多态性检测与他汀类药物临床应用专家共识》[5]建议在首次使用他汀类药物前进行ApoE和SLCO1B1基因多态性检测，以评估治疗效果和减少药物不良反应。本研究旨在探讨ApoE和SLCO1B1基因在指导瑞舒伐他汀钙片调脂中的临床疗效及安全性。

1、材料、对象与方法

1病例选择

2021年1月至2023年10月以本院心血管内科门诊就诊的血脂异常患者入选为研究对象。本研究数据经首都医科大学附属北京世纪坛医院伦理委员会批准公开(伦理批号：KY-2023-0063-003)。

诊断与入选标准符合《中国成年血脂异常防治指南(2016年修订版)》[3]中关于血脂异常的诊断标准。①年龄20～70岁；②体质量指数在18～30 kg·m-2;③否认曾使用他汀类药物，或停药至少2个月；④在纳入研究前，随机血糖、空腹血糖(fasting blood-glucose, FBG)、餐后2 h血糖和糖化血红蛋白(glycosycated hemoglobin, HbA1c)的检测结果均未达到糖尿病的诊断标准。

排除标准甲状腺功能异常者，有肝、肾、血液系统等严重原发性疾病或肝功能异常者，对他汀类药物过敏和家庭性高胆固醇血症患者，对本研究使用的药品过敏者，肌病者，合并恶性肿瘤者，研究期间未按要求服药或失访患者。

2药品、试剂与仪器

瑞舒伐他汀钙片，规格：每片10 mg,批号：LB4821,批准文号：国药准字H20203224,阿斯利康药业(中国)有限公司生产。人类ApoE和SLCO1B1基因检测试剂盒，均由武汉友芝友医疗科技股份有限公司生产；金麦格基因组DNA提取试剂盒，常州金麦格生物技术有限公司生产。

Gentier96E全自动荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)仪，西安天隆科技有限公司产品；DOF-9696PRO全自动核酸提取纯化仪，常州金麦格生物技术有限公司产品；AU5832全自动生化分析仪，美国贝克曼库尔特有限公司产品；DCA Vantage糖化血红蛋白测定仪，德国拜耳医药有限公司产品。

3分组与治疗方法

根据ApoE基因型将患者分为E2组(ε2/ε2、ε2/ε3)、E3组(ε3/ε3、ε2/ε4)、E4组(ε3/ε4、ε4/ε4)。根据SLCO1B1基因型将患者分为TT组(*1a/*1a、*la/*1b、*lb/*lb)、TC组(*la/*5、*1a/*15、*lb/*15)、CC组(*15/*15)。所有患者均给予瑞舒伐他汀钙片，每次10 mg,每晚1次，口服，持续治疗6个月。

4观察指标

脂代谢、糖代谢、肝肾功能及肌酸激酶(creatine kinase, CK)测定于治疗前和治疗6个月后，采集所有患者空腹静脉血3 mL,以3 000 r·min-1离心10 min,获取血清，用全自动生化仪检测血清TG、总胆固醇(total cholesterol, TC)、LDL-C、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、FBG、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase, GPT)、谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase, GOT)、肌酸酐(creatinine, Cr)和CK水平，用HbA1c测定仪检测HbA1c。

ApoE和SLCO1B1基因检测采集所有患者静脉血3 mL,用乙二胺四乙酸二钾抗凝，用全血基因组核酸提取和纯化试剂盒提取基因组DNA。将SLCO1B1*1b、SLCO1B1*5、ApoE2、ApoE4及内标反应液23μL依次加入200μL PCR 8联管内，然后加入基因组DNA 2μL,做弱阳性和空白对照。将PCR反应管置于扩增仪中，设置扩增程序：37℃10 min, 95℃预变性5 min, 95℃15 s, 60℃45 s, 40个循环，反应体系25μL。荧光信号采集为FAM通道(SLCO1B1*1b388A、SLCO1B1*5521T、ApoE2 526C、ApoE4 388T)、VIC通道(SLCO1B1*lb388G、SLCO1B1*5521C、ApoE2 526T、ApoE4 388C)以及ROX通道(内标基因),数据采集在60℃条件下进行。

安全性评价治疗期间监测肌痛的发生情况。

5统计学处理

用SPSS 26.0软件进行统计分析。计数资料用率或构成比表示，不同基因型间变量比较用χ2检验。符合正态分布的计量资料用

表示，不同基因型间基线血脂指标和服药后血脂指标变化值的比较用单因素方差分析，2组基因型间比较用独立样本t检验。符合非正态分布的计量资料用中位数和四分位数间距表示，2组基因型间比较用Mann-Whitney检验，2组以上基因型间比较用Kruskal-Wallis检验。

2、结果

1一般资料

本研究共筛选1 800例，入组1 769例，未完成全疗程治疗脱落64例，自然失访脱落12例，最终有1 693例纳入统计分析。1 693例患者的年龄、性别、体质量、体质量指数、血压等一般资料，见表1。

2 ApoE、SLCO1B1基因型与等位基因频率分布特征

1 693例患者的ApoE基因rs7412(526C>T)、rs429358(388T>C)和SLCO1B1基因rs2306283(388A>G)、rs4149056(521T>C)各基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(均P>0.05),表明基因遗传保持稳定。结果见表2。

表11 693例患者的一般资料

表21 693例患者载脂蛋白E(ApoE)、溶质载体有机阴离子转运蛋白家族1B1(SLCO1B1)等位基因型和等位基因频率分布情况

表3瑞舒伐他汀治疗前后ApoE各基因型患者血脂水平的比较(mmol·

表4瑞舒伐他汀治疗前后SLCO1B1各基因型患者肝肾功能及空腹血糖(FBG)水平的比较

3瑞舒伐他汀治疗前后ApoE各基因型血脂水平的比较

治疗前，3组ApoE基因型患者的TG、TC、LDL-C和HDL-C水平比较，在统计学上差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗后，3组ApoE基因型患者的TC、TG及LDL-C水平均有所下降，HDL-C水平均有所提高，其中，瑞舒伐他汀对E2组的调脂作用最强。结果见表3。

4瑞舒伐他汀治疗前后SLCO1B1各基因型肝肾功能及FBG、HbAlc水平的比较

治疗前，TT组、TC组、CC组的GPT、GOT、CK、Cr、FBG和HbA1c比较，在统计学上差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗后，CC组的CK水平均显著高于TT组和TC组，在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05),TC组的CK水平显著高于TT组，在统计学上差异有统计学意义(P<0.05)。结果见表4。

治疗后，TT组、TC组和CC组的FBG升高发生率分别为0.45%(6例/1 340例)、0.30%(1例/334例)和5.26%(1例/19例),在统计学上差异均无统计学意义(均P>0.05);TT组、TC组和CC组的HbA1c均在正常范围内，提示在瑞舒伐他汀调脂治疗期间并未引起糖尿病。

5 SLCO1B1、ApoE不同基因型组肌痛发生率的比较

TT组、TC组和CC组的肌痛发生率分别为3.13%(42例/1 340例)、5.99%(20例/334例)和10.53%(2例/19例),SLCO1B1不同基因型患者的肌痛发生率比较，在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。E2组、E3组和E4组的肌痛发生率分别为4.90%(10例/204例)、3.83%(47例/1 226例)和2.66%(7例/263例),ApoE不同基因型患者的肌痛发生率比较，在统计学上差异均无统计学意义(均P>0.05)。

3、讨论

ApoE和SLCO1B1基因多态性影响他汀类药物的调脂效果和肌肉毒性[6]。人类ApoE基因2个位点[388T>C(rs429358)、526C>T(rs7412)]形成epsilon2[ε2(388T-526T)]、ε3(388T-526C)和ε4(388C-526C)3个等位基因，其中ε3最常见，ε2最罕见[7]。本研究结果发现，ε2、ε3、ε4的频率分别为12.05%、72.42%和15.53%,与上述研究一致。研究发现，ε2基因携带者的血浆TC和LDL-C水平均较ε3、ε4型低[8]。瑞舒伐他汀在ε2基因携带者中表现出强烈的降脂作用，而在ε4基因携带者中降脂效果较差[9]。本研究结果显示，经瑞舒伐他汀治疗后，ε2基因携带者的血浆TC和LDL-C均显著低于ε3、ε4型，而ε4基因携带者的血浆HDL-C均显著低于ε2、ε3型。

SLCO1B1基因多态性涉及c.388A>G(rs2306283)和c.521T>C(rs4149056) 2个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP),形成4种功能不同的单倍型[SLCO1B1*1a(c.388A-c.521 T)、*1b(c.388G-c.521T)、*5(c.388A-c.521C)和*15(c.388G-c.521C)],产生9种基因型(1a/*1a、*la/*1b、*lb/*lb、*la/*5、*1a/*15,*lb/*15、*5/*5、*5/*15、*15/*15)[10-12],其中，rs4149056的C等位基因导致有机阴离子转运多肽1B1(organic anion transport polypeptide 1B1,OATP1B1)转运活性降低，增加他汀类药物血浆浓度。SLCO1B1 c.521C的携带者可能更容易出现肌痛等药物不良反应[13]。据报道，在亚洲人群中，SLCO1B1*1b占60%～70%,*15约占10%～20%,*5<1%[14]。本研究中，*1a、*1b、*15、*5等位基因频率分别为27.52%、61.49%、10.96%和0.03%,证实了上述观点。

关于他汀类药物对新发糖尿病的影响仍存在争议。CARTER等[15]研究表明，他汀类药物可能会增加新发糖尿病的风险。毕君霞[16]研究显示，瑞舒伐他汀主要通过增加胰岛素抵抗来影响血糖。本研究未发现瑞舒伐他汀治疗引起FBG升高，但可能与基础血糖水平及药物剂量有关。

本研究提示：瑞舒伐他汀治疗期间需关注SLCO1B1、ApoE基因多态性，尤其在血脂异常患者中。携带ApoEε2基因可能对降低TG、LDL-C水平有积极影响，而ε4基因可能会减弱疗效，需谨慎考虑个体基因差异。SLCO1B1 521T>C基因多态性与瑞舒伐他汀引起肌痛风险增加相关，携带CC基因型患者更易出现肌痛。在临床治疗中，需监测血脂异常患者肌肉状况，根据基因型检测结果调整剂量或考虑替代治疗，确保患者的安全和疗效最大化。

参考文献:

[3]中国成人血脂异常防治指南修订联合委员会.中国成人血脂异常防治指南(2016年修订版)[J].中国循环杂志,2016,31(10):937—950.

[4]李静,袁圆,马丽娟,等.SLCO1B1和ApoE基因多态性对不同种类中等强度剂量他汀降脂疗效的影响[J].中国临床药理学杂志,2023,39(18):2626—2630.

[5]中国中西医结合学会检验医学专业委员会,浙江省免疫学会临床免疫诊断专业委员会,浙江省药理学会治疗药物监测研究专业委员会.SLCO1B1和ApoE基因多态性检测与他汀类药物临床应用专家共识[J].中华检验医学杂志,2023,46(7):672—680.

[9]何莎,苑梦伟,高雁,等.河北汉族ApoE基因多态性与心脑血管疾病的相关性[J].首都医科大学学报,2023,44(5):852—858.

[16]毕君霞.他汀类药物对高胆固醇血症患者血糖及FGF21水平的影响[D].山东青岛:青岛大学,2018.

基金资助:科技部国家重点研发计划基金资助项目(2020YFC2005403､2020YFC2005404);北京市重大疫情防治重点专科建设类基金资助项目(ZDYQFZZDZK);国铁集团医疗卫生专项科研项目计划基金资助项目(J2021Z610);

文章来源:赵国敏,赵磊,张辉,等.ApoE和SLCO1B1基因指导瑞舒伐他汀调脂的临床研究[J].中国临床药理学杂志,2024,40(22):3219-3223.