首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 儿科论文 > 小儿疑难病论文 > 儿童伯基特淋巴瘤的临床病理学特征及PCBP1表达意义

儿童伯基特淋巴瘤的临床病理学特征及PCBP1表达意义

2024-07-10 132 上传者：管理员

摘要：目的探讨儿童伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma, BL)的临床病理学特征及PCBP1表达意义。方法收集47例儿童BL的临床资料，免疫组化检测PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2,原位杂交检测EBER,荧光原位杂交检测c-myc、11q23.3/11q24.3基因。统计学分析PCBP1与临床参数及MUM1的表达关系。结果 47例患者中男性36例、女性11例，平均就诊年龄6岁2月(2岁1月～13岁),发病部位腹腔35例、头颈部11例、鼻腔1例；临床分期为Ⅱ期10例、Ⅲ～Ⅳ期37例。免疫表型PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2的阳性表达率分别为100%(47/47)、63.8%(30/47)、100%(47/47)、97.9%(46/47)、0%(0/47);EBER阳性率为27.7%(13/47),c-myc基因重排率为100%(47/47),无11q23.3/11q24.3基因异常(0/15)。47例BL中PCBP1细胞核和细胞质同时阳性表达38例，9例仅为细胞质阳性表达。PCBP1阳性表达模式与性别、发病年龄、发病部位、临床分期、MUM1和EBER表达均无关(P>0.05)。结论儿童伯基特淋巴瘤主要与伴11q异常的高级别B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤进行鉴别，联合检测CD38、c-myc、LMO2和EBER具有诊断和鉴别诊断价值。PCBP1在儿童伯基特淋巴瘤中高表达，其表达模式的具体意义和机制有待进一步研究。

关键词：
B细胞
PCBP1
伯基特淋巴瘤
免疫组织化学
病理学
加入收藏

伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma, BL)是起源于生发中心B细胞的高度侵袭性淋巴瘤，在形态学和免疫表型方面与其他成熟B细胞淋巴瘤有很大重叠，当组织标本较小或固定不良时，诊断具有一定的困难[1,2,3]。虽然BL的治愈率逐步提高，但仍有少部分患者因复发而死亡[4]。由于目前的治疗方案容易使患者在化疗早期出现急性肿瘤溶解综合征而致死亡，即使出现肿瘤综合征的患者度过危险期，在规律化疗后停药仍可出现复发，其预后较差[5]。充分了解BL的发病机制有望为BL的诊断和治疗提供新的理论依据。有研究发现伯基特淋巴瘤存在PCBP1突变，但关于PCBP1蛋白在BL中的表达鲜见相关报道[6]。本文对47例BL进行临床病理学特征总结，并探讨PCBP1的表达意义。

1、资料与方法

1.1病例收集

收集2016年1月至2023年2月江西省儿童医院病理科存档的非霍奇金淋巴瘤标本和会诊病例，根据WHO(2017)造血与淋巴组织肿瘤分类标准[3],选取资料完整的BL病例47例。全部病例均由两位经验丰富的病理医生进行诊断分类。

1.2方法

1.2.1常规病理和免疫组化染色

常规切片HE染色，所用抗体为PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2,实验步骤按照说明书进行，DAB显色。组织芯片制作参考文献[1]。结果判断：肿瘤细胞显示棕黄色颗粒为阳性[1]。MUM1、c-myc和LMO2为细胞核着色，CD38为细胞膜着色，PCBP1为细胞核/细胞质或细胞质着色。本实验c-myc阳性阈值为80%,其他指标阈值为30%。

1.2.2 EBER原位杂交

EBER原位杂交试剂盒购自福建泰普生物科技有限公司，实验步骤按照说明书进行，DAB显色。结果判断：肿瘤细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性[1]。

1.2.3荧光原位杂交

c-myc和11q23.3/11q24.3基因实验步骤按照说明书进行。

1.3统计学方法

采用SPSS 22.0统计软件进行分析，χ2检验或Fisher精确检验法比较PCBP1表达与临床病理参数的关系。

2、结果

2.1临床特征

47例中男性36例、女性11例，年龄2岁1个月～13岁，平均年龄6岁2个月；发病部位腹腔35例(位于肠腔内18例、肠系膜和/或网膜15例、肠腔+肠系膜/网膜2例),头颈部11例，鼻腔1例；位于肠腔内BL在大体上表现为息肉样4例、表现为肠壁增厚或肿块形成14例；临床分期Ⅱ期10例、Ⅲ～Ⅳ期37例。

2.2组织形态学特征

46例为典型BL组织学形态：形态一致的中等大小肿瘤细胞弥漫分布，核圆形，染色质粗，核仁1～4个，星空现象明显。肠腔内BL均侵犯肠组织全层，发生于颈部淋巴结者1例表现为淋巴结部分破坏。1例送检组织挤压明显，中等大小肿瘤细胞弥漫或条索状分布，核染色质粗，可见较多凋亡小体，胞质稀少嗜碱性或核周透亮。

2.3免疫表型和原位杂交

47例BL中PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2的阳性表达率分别为100%(47/47)、63.8%(30/47)、100%(47/47)、97.9%(46/47)、0%(0/47);EBER阳性率为27.7%(13/47)。47例BL中c-myc阳性细胞数大于80%者46例(其中阳性细胞大于95%者41例，5例介于80%～95%之间),1例60%细胞中等阳性。

47例BL中PCBP1细胞核和细胞质同时阳性表达38例，阳性率80.85%,9例仅为细胞质阳性表达，阳性率19.15%。PCBP1阳性表达模式与性别、发病年龄、发病部位、临床分期、MUM1和EBER表达均无关(P值分别为0.730、0.968、1.000、0.596、0.733、1.000)。

2.4荧光原位杂交

c-myc基因重排率为100%(47/47),无11q23.3/11q24.3基因异常(0/15)。1例c-myc基因断裂并部分缺失。

3、讨论

第五版淋巴造血系统肿瘤WHO分类中Burkitt淋巴瘤(BL)的定义基本保持不变，将BL描述为一种侵袭性成熟B细胞肿瘤，由中等大小的细胞组成，具有生发中心B细胞表型CD10+、BCL6+、BCL2-/弱+、高Ki-67增殖指数(>95%)和IG-MYC基因易位[7]。在淋巴造血系统肿瘤WHO分类中指出[3],任何单一参数(如组织形态学、免疫表型和分子遗传学)都不能作为BL诊断的金标准，根据组织形态学，需要结合免疫组化和分子遗传学检测来提高BL的诊断率。

在组织形态学上，BL典型形态学是单一的具有黏附性的中等大小细胞弥漫分布，具有大量核分裂象、凋亡细胞和散在巨噬细胞形成的“星空”现象。细胞核中等大小、圆形单一形态(类似于组织细胞的细胞核),染色质呈颗粒状或点状，以及几个偏位的嗜碱性核仁。在“非典型”形态的病例中，核仁可能更突出，细胞核更多形性或表现出浆细胞样特征[3]。无论是结内还是结外病例，BL的组织形态学均相似，只是由于部位不同，取材时可能会导致细胞挤压而容易出现误诊。当肿瘤细胞被挤压或因固定不良时，在形态学上难以辨认，免疫组化和基因检测就显得更加重要了。

在免疫表型上，典型BL表达B细胞标记物(CD19、CD20、CD79a、CD22和PAX5)和生发中心标记物(CD10和BCL6),极少数病例缺乏CD10或BCL6的表达[1],需要根据形态学，综合其他免疫标记物和基因检测结果来综合判断。有文献报道，对于儿童病例[8],如果形态及免疫表型呈现Burkitt(样)时，先行c-myc蛋白的检测，大于80%的瘤细胞阳性则直接诊断为BL,如c-myc小于80%的瘤细胞阳性，再进行c-myc基因检测。根据其他文献报道及我们在实际工作发现，有极少数c-myc小于80%的瘤细胞阳性(或阴性)病例仍存在c-myc基因易位，可能存在从MYC向MYCN的转换机制，这一发现表明MYCN可能是此类病例的诊断标志物[9]。从我们的实验研究显示，存在CD38+/LMO2-免疫表型的BL均有c-myc基因易位，因此联合检测CD38和LMO2有助于BL的诊断和鉴别诊断，与文献[10]报道一致。本组1例鼻腔病例因组织挤压从形态学上难以判断淋巴瘤类型，根据免疫表型和c-myc基因检测结果仍支持BL的诊断。

在分子遗传学方面，90%病例存在c-myc基因易位，约10%的病例通过荧光原位杂交技术未能检测到c-myc基因易位，其中可能有部分病例归类为伴11q异常的Burkitt样淋巴瘤[3],第五版淋巴造血系统肿瘤WHO分类中将其更名为伴11q异常的高级别B细胞淋巴瘤[7]。需要值得注意的是，伴11q异常的高级别B细胞淋巴瘤有着与BL相似的免疫表型，包括c-myc蛋白高表达[11],Ki-67增殖指数大于95%[12],甚至c-myc基因易位BL也可能存在11q异常[13],因此需要综合多参数来进行诊断和鉴别诊断。谢建兰等[14]对19例11q异常的Burkitt样淋巴瘤和75例BL进行了对比分析，联合检测CD38、LMO2和EBER等有助于两者的鉴别诊断。

PCBP1属于Poly(C)-binding protein(PCBP)家族中的RNA结合蛋白，主要参与细胞内基因转录、mRNA稳定、翻译沉默或翻译增强等功能。目前关于PCBP1在人类肿瘤中的表达情况报道较少。Shi等[15]利用免疫组化方法对葡萄胎患者样本进行分析，发现PCBP1的表达水平与葡萄胎恶性转化及血清人绒毛膜促性腺激素水平呈负相关。Liu等[16]用Western blot和免疫组化方法对非小细胞肺癌标本进行PCBP1检测，发现PCBP1高表达与淋巴结转移和临床分期有关，且是上皮间质转化的负调节蛋白。Guo等[17]用免疫组化方法对20例L-OHP敏感和20例L-OHP耐药的结直肠癌患者样本进行分析，发现PCBP1在L-OHP耐药标本中高表达，敲除PCBP1基因可以抑制Akt的活化。研究表明PCBP1可以作为L-OHP耐药的结直肠癌治疗靶点。有研究发现11%伯基特淋巴瘤存在PCBP1突变，有趣的是，PCBP1突变的伯基特淋巴瘤表达MUM1[6]。有研究证实MUM1阳性成人伯基特淋巴瘤预后较MUM1阴性者差，MUM1阳性伯基特淋巴瘤还与患者性别、发病年龄、部位、bcl-6表达和EBV感染有关[18]。本实验发现，儿童BL存在高表达PCBP1,38例BL中PCBP1细胞核和细胞质同时阳性表达，9例仅为细胞质阳性表达，这也符合PCBP1蛋白既可在细胞核中发挥作用，也可在细胞质中调节细胞的功能[19]的特性，但本实验中PCBP1阳性表达模式与患者性别、发病年龄、部位、临床分期、MUM1表达和EBV感染无关，可能是因为样本量较少，其表达意义和机制有待进一步研究。

参考文献:

[1]杨文萍,朱才娣,宫丽平,等.儿童腹腔非霍奇金B细胞淋巴瘤的临床病理及免疫表型分析[J].中华病理学杂志,2009,38(11):759-764.

[2]黄慧,杨文萍,宫丽平,等.儿童散发性伯基特淋巴瘤的分子遗传学特征分析[J].中华病理学杂志,2010,39(12):819-824.

[4]黄慧,徐红艳,杨文萍,等.儿童伯基特淋巴瘤29例临床病理分析[J].临床与实验病理学杂志,2014,30(2):216-217.

[5]黄爽,杨菁,张蕊,等.儿童成熟B细胞淋巴瘤并发急性肿瘤溶解综合征18例临床分析[J].中华儿科杂志,2011,49(8):622-625.

[8]韦萍,张燕林,谢建兰,等.具第11号染色体长臂异常的Burkitt样淋巴瘤的临床病理特征[J].中华病理学杂志,2018,47(3):176-179.

[12]张延平,张岚,张丹丹,等.具有11号染色体长臂异常的Burkitt样淋巴瘤的临床病理及分子遗传学特征[J].中华病理学杂志,2021,50(6):604-608.

[14]谢建兰,郑媛媛,张燕林,等.伴有11q异常Burkitt样淋巴瘤19例临床病理分析[J].诊断病理学杂志,2021,28(3):161-166,171.

[19]张雪甜,狄翠霞,陈玉红,等.PCBP1在肿瘤中的作用及研究进展[J].现代肿瘤医学,2020,28(21):3811-3816.

基金资助:江西省卫生健康委员会科技计划项目(编号:20203677);江西省卫生健康委员会科技计划项目(编号:202311080);

文章来源:吴艳,黄慧,樊金星,等.儿童伯基特淋巴瘤的临床病理学特征及PCBP1表达意义[J].实用癌症杂志,2024,39(07):1210-1213.