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急诊眼外伤标本病原菌分布情况及药物敏感试验结果分析

2020-08-25 135 上传者：管理员

摘要：目的：分析急诊眼外伤标本病原菌分布及药物敏感试验结果,为急诊眼外伤抗菌药物的合理使用提供依据。方法：以2017年1月至2019年1月首都医科大学附属北京同仁医院急诊眼科收治的336例疑诊为眼外伤外源性眼内炎、需要进行实验室检查的患者为研究对象,收集送检的眼外伤标本,经涂片染色镜检、细菌培养、真菌培养及厌氧菌培养分离出病原菌,对分离出的病原菌种类及药物敏感试验结果进行分析。结果：336例患者标本中共分离到151株病原菌,阳性检出率为44.9%(151/336),其中革兰阳性球菌82株[54.3%(82/151)],革兰阴性杆菌29株[19.2%(29/151)],革兰阳性杆菌14株[9.3%(14/151)],革兰阴性球菌8株[5.3%(8/151)],真菌8株[5.3%(8/151)],厌氧菌9株[6.0%(9/151)],皮疽奴卡菌1株[0.7%(1/151)]。检出的病原菌位于前3位的分别为表皮葡萄球菌27株[17.9%(27/151)]、肺炎链球菌25株[16.6%(25/151)]、流感嗜血杆菌14株[9.3%(14/151)]。革兰阳性球菌中所占构成比最高的表皮葡萄球菌对青霉素[55.6%(15/27)]和红霉素[51.9%(14/27)]的耐药率较高,对万古霉素和利奈唑胺的敏感率最高,均为100.0%;革兰阴性杆菌中所占构成比最高的流感嗜血杆菌对氨苄西林[42.9%(6/14)]和头孢曲松[28.6%(4/14)]的耐药率较高,对亚胺培南的敏感率[92.9%(13/14)]最高;真菌对两性霉素B[37.5%(3/8)]的耐药率最高,对伏立康唑的敏感率[75.0%(6/8)]最高。结论：急诊眼外伤标本病原菌谱分布较广,病原菌培养及药物敏感试验结果可以为急诊眼外伤用药提供有针对性的指导。

关键词：
急诊眼外伤
病原菌分布
耐药
药物敏感试验
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急诊眼科患者以眼外伤为主，其他还包括眼表炎性反应、原发性闭角型青光眼急性发作等[1]。眼外伤是我国致盲眼病主要因素之一[2,3]，受伤后眼部正常解剖结构破坏所引起的继发性感染对患者视力造成很大影响，及时给予预防性抗菌药物可以减少并发症的发生。明确急诊眼外伤患者病原菌分布及药物敏感情况，可以为急诊眼外伤患者抗菌药物的合理使用提供依据，同时对于指导急诊眼外伤早期经验性用药具有重要意义，以确保及时、有针对性地帮助临床处理急诊患者，最大限度挽救患者视力。目前，有学者对眼内炎或化脓性眼内炎进行了相关研究[4,5]，但具体针对急诊眼外伤标本的病原菌分布及药物敏感情况的研究较少。本研究分析了2017年1月至2019年1月首都医科大学附属北京同仁医院急诊眼科送检的336例眼外伤标本的病原菌分布及药物敏感试验结果，旨在为急诊眼外伤诊疗提供帮助。

1、资料与方法

1.1一般资料

选择2017年1月至2019年1月首都医科大学附属北京同仁医院急诊眼科就诊的336例患者为研究对象，均为眼科医生根据临床检查（视力、裂隙灯、眼底、眼部B超等）结果，疑诊为眼外伤外源性眼内炎，且需要进行实验室检查的患者，其中男259例（77%），女77例（23%）；年龄（37.33±14.46）岁；右眼外伤177例，左眼外伤159例。

1.2仪器与试剂

Vitek2Compact全自动微生物鉴定系统（生物梅里埃公司，法国）；基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪（BrukerautoflexTMMALDI-TOF-MS，布鲁克公司，德国）；厌氧仪（AN2CTS,MART公司，荷兰）；CO2培养箱（SHP-450，森信试验仪器有限公司，中国）。巧克力血琼脂培养基、哥伦比亚血琼脂培养基、麦康凯培养基、沙保罗培养皿、厌氧培养皿（天津金章生物科技有限公司，天津）。质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212、大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC13883、铜绿假单胞菌ATCC27853、白色假丝酵母菌ATCC90029、近平滑假丝酵母菌ATCC22099。

1.3方法

1.3.1标本采集

收集所有研究对象送检的眼外伤标本。标本采集按照眼科检验协助组制定的《感染性眼病细菌学检查操作专家共识（2019）》取样原则及操作规范进行。

1.3.2标本接种

标本均接种于巧克力血琼脂培养基、哥伦比亚血琼脂培养基、麦康凯培养基、沙保罗培养皿、厌氧培养皿。巧克力血琼脂培养基、哥伦比亚血琼脂培养基置于5%～10%CO2培养箱培养24～48h；麦康凯培养基置于35℃培养箱培养24～48h；沙保罗培养皿置于25℃培养箱培养24～72h；厌氧培养皿置于厌氧罐中35℃培养24～72h。每批试剂均有质控记录。

1.3.3病原微生物鉴定

使用Vitek2Compact全自动微生物鉴定系统或基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行鉴定。

1.3.4药物敏感试验

使用Vitek2Compact全自动微生物鉴定系统、纸片扩散法和最小抑菌浓度（MIC）法进行药物敏感试验。

1.4统计学处理

采用WHONET5.4统计软件分析系统和EXCEL2017软件对数据进行统计和分析。

2、结果

2.1病原菌分布

336例患者标本中共分离151株病原菌，阳性检出率为44.9%(151/336），其中革兰阳性球菌82株[54.3%(82/151）]，革兰阴性杆菌29株[19.2%(29/151）]，革兰阳性杆菌14株[9.3%(14/151）]，革兰阴性球菌8株[5.3%(8/151）]，真菌8株[5.3%(8/151）]，厌氧菌9株[6.0%(9/151）]，皮疽奴卡菌1株[0.7%(1/151）]。检出的病原菌构成比居前5位的分别为表皮葡萄球菌27例[17.9%(27/151）]、肺炎链球菌25株[16.6%(25/151）]、流感嗜血杆菌14株[9.3%(14/151）]、口腔链球菌6例[4.0%(6/151）]、溶血葡萄球菌5例[3.3%(5/151）]。见表1。另外，151份培养阳性标本均进行了涂片检查，涂片阳性率为70.9%(107/151）。

表1151株急诊眼外伤标本检出病原菌的分布情况[n(%)]

2.2药物敏感试验结果

革兰阳性球菌中所占构成比最高的表皮葡萄球菌对青霉素[55.6%(15/27）]和红霉素[51.9%(14/27）]的耐药率较高，对万古霉素和利奈唑胺的敏感率最高，均为100.0%；革兰阴性杆菌中所占构成比最高的流感嗜血杆菌对氨苄西林[42.9%(6/14）]和头孢曲松[28.6%(4/14）]的耐药率较高，对亚胺培南的敏感率[92.9%(13/14）]最高；其他阴性杆菌对米诺环素、头孢噻肟、头孢他啶的耐药率分别为20.0%、13.3%、6.3%，敏感率分别为73.3%、86.7%、93.3%；真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的耐药率分别为25.0%、37.5%、25.0%、25.0%、12.5%，敏感率分别为62.5%、62.5%、50.0%、62.5%、75.0%，真菌耐药率最高的为两性霉素B[37.5%(3/8）]，敏感率最高的为伏立康唑[75.0%(6/8）]。见表2。

表2急诊眼外伤标本检出的主要病原菌对抗菌药物的敏感率及耐药率（%）

3、讨论

本研究病原菌阳性检出率较高，为44.9%(151/336），这可能与实验室改进了急诊标本的处理程序有关。临床微生物室实行24h值班制，同时加强了标本采集、转运等前处理规范，可提高病原菌阳性检出率。另外，对于急诊眼外伤患者标本的病原菌检查，临床实验室能够最早提供给临床的检查结果是涂片镜检。本研究151份培养阳性标本中，涂片阳性率为70.9%(107/151），通过涂片结果可以快速把标本白细胞数量及病原体形态特征等结果反馈给急诊眼科，有助于临床初步决定治疗方向，应引起重视。

本研究发现，引起急诊眼外伤的病原菌所占构成比居第二位的为肺炎链球菌（16.6%），这与其他研究有所不同[4,5]。除常见的呼吸道来源的肺炎链球菌感染，眼部肺炎链球菌感染须引起急诊眼科重视，同样为革兰阳性球菌的表皮葡萄球菌和肺炎链球菌的药物敏感性有所不同。目前，青霉素仍是治疗肺炎链球菌的首选药物，因耐药率较低、不良反应较少而得到广泛应用。本研究结果显示，肺炎链球菌对青霉素的敏感率高达96.0%，而表皮葡萄球菌仅为44.4%。肺炎链球菌对红霉素耐药机制主要与ERMB基因介导的抗菌药物靶位点修饰及mefA基因介导的主动外排泵有关，本研究中肺炎链球菌对红霉素耐药率为48.0%，与其他文献报道基本一致，说明红霉素已不适合作为肺炎链球菌的经验性常规用药[6,7,8,9,10]。

本研究中，革兰阴性杆菌中所占构成比最高的为流感嗜血杆菌（9.3%），这与其他研究也有所不同[11,12]。不同血清型流感嗜血杆菌感染的部位也有所不同，无荚膜的菌株多见于上呼吸道感染、会厌炎、乳突炎和肺炎，是临床重要的条件致病菌，其致病性同样应引起急诊眼科关注[13,14]。氨苄西林曾经是治疗流感嗜血杆菌感染的有效药物，但随其广泛使用，耐药率也逐年升高[11,12]。本研究显示，流感嗜血杆菌对氨苄西林的耐药率为42.9%，因此，建议急诊眼外伤经验性用药选择部分第三代头孢菌素等敏感性较高的药物。

应高度重视厌氧菌引起的急诊眼外伤感染，本研究共培养出9株厌氧菌，所占构成比为6.0%。临床实验室对厌氧菌的鉴定较难，微生物质谱鉴定系统对厌氧菌检测是有力工具。除了鉴定能力，厌氧菌检测标本的前处理流程同样重要，如有条件最好床旁接种。目前，耐甲硝唑的厌氧菌也常出现[10]，急诊眼科有必要根据厌氧菌培养和药物敏感试验结果进行针对性用药。治疗厌氧菌常用的抗菌药物是氨基糖苷类，而磺胺类药物则对厌氧菌无效[15]。有研究证实，拟杆菌属和其他革兰阴性菌对青霉素的敏感率仅为35.0%和50.0%，但厌氧菌对其敏感率高达90.0%以上，尤其对一些特殊部位的厌氧菌感染仍具有实际治疗意义[16,17,18,19]。开展厌氧菌检测的临床实验室虽然逐年增加，但开展率仅为31.4%，而且主要集中在较大规模的综合性医院[15]，因此，建议临床实验室应尽快建立厌氧菌培养流程。

部分较少引起急诊眼外伤感染的致病菌值得关注，如本研究培养出的皮疽奴卡菌。由于其临床表现缺乏特异性，容易造成漏诊、误诊。由皮疽奴卡菌感染引起皮肤感染常发生于免疫力较强的宿主，研究发现皮疽奴卡菌在免疫功能正常的患者中可引起广泛性感染，而且皮疽奴卡菌同样可引起严重眼部感染[20,21,22,23]。治疗皮疽奴卡菌感染常用的抗菌药物是甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲噁唑联合亚胺培南、阿米卡星或者环丙沙星，利奈唑胺也有良好疗效[21,24]。

4、结论

引起急诊眼外伤的病原菌种类较多，明确其种类及药物敏感性可以更好地指导临床用药。

参考文献：

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