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特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用

2024-06-27 96 上传者：管理员

摘要：目的：探究特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用价值。方法：选取疑似发生结核病患者128例进行临床研究，患者均在医护人员辅助下完成结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法、结核分枝杆菌分离培养检验，以结核分枝杆菌分离培养结果为金标准，统计前两种方法的诊断结果与诊断效能。结果：结核分枝杆菌分离培养结果如下，阳性、阴性检出率分别是62.50%与37.50%。结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法的阳性率、阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。特异性T细胞体外释放酶联免疫法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值大于结核菌素皮肤试验(P<0.05)。结论：结核病临床诊断中应用特异性T细胞体外释放酶联免疫法，诊断效能较好，值得临床推广。

关键词：
特异性T细胞体外释放酶联免疫法
结核分枝杆菌分离培养检验
结核病
结核菌素皮肤试验
诊断效能
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结核病是因结核分枝杆菌侵入人体并造成感染，诱发以呼吸道感染为主要表现的一类慢性传染性疾病。现今尚未研究出结核病根治方案，结核病依然是导致人类死亡的主要传染性疾病。结核分枝杆菌经空气传播，侵入人体后会对全身器官造成侵犯。有统计表明，我国每年新增100万肺结核患者[1]。有研究指出，现今我国的结核病治疗方案具有重大突破，我国结核病患者的治愈率已经达到90%[2]。若能尽早确诊结核病，尽早实施规范科学治疗，无疑可有效降低结核病的治疗难度，降低患者的死亡率。但早期治疗结核病的前提是早期准确诊断结核病。现今用于诊断结核病的方法较多，不同方法具有不同诊断效能。此次研究以128例疑似结核病患者为对象，探讨特异性T细胞体外释放酶联免疫法的诊断价值，报告如下。

1、资料与方法

1.1 一般资料

2021年10月～2023年6月，选取鹤壁市第三人民医院疑似发生结核病患者128例进行临床研究。男88例，女40例；年龄均值（42.36±5.46）岁。纳入标准：患者症状表现疑似肺结核；患者具有实验室检查指征；患者提供详细个人资料；患者配合完成3项检查。排除标准：患者对结核蛋白过敏；患者参与研究前使用免疫抑制剂；患者存在免疫缺陷；患者存在急性传染病。

1.2 方法

结核菌素皮肤试验：运用孟都氏法，准备75%酒精，消毒患者的左侧前臂内侧1/3部位皮肤，准备结核菌素纯蛋白衍生物，采集0.1ml进行皮内注射，令局部出现皮丘。注射48～72h后，观察患者的局部硬结，测量、记录硬结直径，平均硬结直径通过（纵径+横径）/2得出。结果判断标准如下：阴性（-），得出平均硬结直径小于5mm；弱阳性（+），得出平均硬结直径是5～9mm；阳性（++），得出平均硬结直径是10～19mm；强阳性（+++），得出平均硬结直径大于19mm，或是合并水疱、双圈以及坏死表现。特异性T细胞体外释放酶联免疫法：提前告知患者禁食禁饮，采集5ml空腹静脉血样，置入无菌肝素抗凝管，于2h内送检，应用特异性T细胞体外释放酶联免疫试剂盒进行检测，严格遵循试剂盒说明书完成相应检测工作。在试剂盒未使用时，储藏在2～8℃环境中，有效期是12个月。需应用试剂盒时，取出病在室温环境下持续放置0.5h，应用前轻轻摇晃试剂盒让其均匀，使用后立刻密闭病将其置入2～8℃环境中保存。未用完的干燥剂等放在自封袋密封，于2～8℃环境中保存，保存时间不能超过3周，复溶后校准品必须在当天使用完毕。结果评估标准如下：测试管、对照管差值>14pg/ml，差值同时≥对照组1/4，则是阳性。

1.3 统计学方法

应用SPSS26.0比较分析相关指标。

2、结果

2.1 不同方法的诊断结果统计（见表1)

表1 不同方法的诊断结果比较

2.2 不同方法的诊断效能统计（见表2)

表2 不同方法的诊断效能比较

3、讨论

结核病属于全球常见传染病，也是影响公民正常生存的主要传染性疾病[3]。有研究指出，我国感染结核分枝杆菌的公民多达5.5亿人，肺结核占多数，是结核分枝杆菌高感染国家[4]。我国现有活动性肺结核500万，存在传染性的公民超过四分之一。结核病传播不仅会对患者本人的身心状态造成严重影响，还会加重患者的身心痛苦，增加患者亲朋好友、社会群众的结核病发生风险。为有效预防结核病，我国免费提供卡介苗为出生24h以内的新生儿接种，这是控制结核病疫情的有效方式[5,6,7,8]。受人口流动性增强，结核分枝杆菌多重耐药菌增多、艾滋病合并结核病发生率升高等问题影响，我国结核病防控形势越发严峻，更突出快速、有效诊断结核病的必要性和重要性。结核病多通过实验室诊断确诊，诊断方法包括传统细菌学、近些年兴起的免疫学及分子生物学等，不同方法的诊断效果不一样。鉴于结核病防控形势不佳，选择敏感性与特异性更强，准确性更高的结核病诊断方法，是非常有必要的[8,9,10]。

结核菌素皮肤试验从19世纪开始应用至今，在结核分枝杆菌感染诊断中发挥显著作用。该法具有简单好操作、容易掌握、费用低廉、对仪器设备的要求偏低等多种优势。伴随着该法的广泛应用，该法的缺陷日益凸显[11,12,13]。结核菌素皮肤试验无法区分结核分枝杆菌感染诱发的应答、接种卡介苗出现的免疫应答，所以会有假阳性现象发生。若受检者存在免疫抑制现象，应用该法诊断，敏感性不足，所以误诊率、漏诊率比较高。结核分枝杆菌分离培养是结核分枝杆菌感染的金标准诊断方法，但受取材、培养环境等限制，多数结核病患者的培养结果并非阳性，尤其是肺结核患者[12,13,14]。有研究指出，特异性T细胞体外释放酶联免疫法是结核分枝杆菌感染的理想诊断方法，具有极高的灵敏度、特异度，有利于临床尽早识别结核病患者[15]。此次研究显示，结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法的阳性、阴性检出率无差异，但五项诊断效能存在鲜明差异，均是后者大于前者。原因分析如下，结核菌素皮肤试验容易被卡介苗、结核分枝杆菌等干扰，但特异性T细胞体外释放酶联免疫法可排除上述干扰因素，所以诊断准确性比较高。但此次研究也存在一定缺陷，以疑似发生结核病患者为对象，并未区分肺内结核病与肺外结核病，并未进一步分析特异性T细胞体外释放酶联免疫法在鉴别不同结核病中的应用价值，临床还需增加样本量，扩大范围继续研究[16]。

综上可知，结核病运用特异性T细胞体外释放酶联免疫法诊断，具有极高的诊断效能，值得临床推广。

参考文献:

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[7]杨小玉,李青峰,王冬梅.斑点免疫胶体金渗滤法､免疫层析法联合酶联免疫法检测结核抗体诊断结核病的应用价值分析[J].四川解剖学杂志,2019,27(04):8-9.

[8]雷战平.免疫组化法在结核病理诊断中的应用[J].中外医学研究,2019,17(07):68-70.

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[10]潘洪龙.免疫法测结核抗体与痰涂片镜检法的比较分析[J].世界最新医学信息文摘,2017,17(A3):173.