首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 儿科论文 > 儿科职称论文 > 纸片法与平板计数法在托幼机构环境菌落总数检测中的应用分析

纸片法与平板计数法在托幼机构环境菌落总数检测中的应用分析

2025-01-10 40 上传者：管理员

摘要：目的分析纸片法与平板计数法检测托幼机构环境菌落总数的应用效果。方法随机选取新乡市50所托育机构作为研究对象，对机构中的工作人员皮肤、物品及室内空气进行纳入采样，分别为手部皮肤(n=100)、物品表面(n=100)、室内空气(n=50)，随后对以上样本进行纸片法、平板计数法检测，分析其在检测结果、培养时间、室内空气采样时间方面的差异。结果两种检测方案在手部皮肤、物品表面的检测结果无显著性差异(P> 0.05)，但在室内空气评估检测时，纸片法检测的结果显著高于平板计数法的，差异有统计学意义(P <0.05)；在菌落方面，平板计数法培养结果 (工作人员手部皮肤、物品表面、室内空气)1 d与2 d之间，存在显著差异，且培养2 d后的结果显著高于1 d的结果，差异有统计学意义(P <0.05)。但是在纸片法培养结果中，1 d与2 d的结果情况基本一致，差异无统计学意义(P> 0.05)；不同检测方案室内空气采样时间方面，培养1 d的结果中，纸片法在3 min、5 min、10 min、15 min采样的结果均高于采样5 min的平板计数法，差异有统计学意义(P <0.05)；但在培养2 d的结果中，纸片法仅在3 min、5 min采样结果高于采样5 min的平板计数法(P <0.05)，一旦采样时间在10 min、15 min时，两者间无显著差异性(P> 0.05)。结论纸片法进行托幼机构环境菌落总数检测的价值优于平板计数法，而且更加快捷、便利，具有推广应用意义。

关键词：
儿童健康
平板计数法
托幼机构
环境菌落总数
纸片法
加入收藏

托幼机构是儿童早期学习、娱乐和生活的重要场所。儿童由于免疫系统尚未完全发育，对环境微生物污染的抵抗力较弱，若托幼机构环境卫生质量差，极易暴发与传播传染病[1]。因此，确保托幼机构环境卫生安全是保护儿童健康的重要措施。有研究[2]提出，环境菌落总数作为评估微生物污染程度的关键指标，其检测方法的准确性和效率对于维护环境卫生具有重要意义。然而，传统的平板计数法对检测环境菌落总数存在诸多局限性，该方法不仅操作复杂，需要专业人员进行，而且耗时较长，不利于快速响应和处理潜在的卫生问题[3]。为了提高检测效率，降低成本，并使得检测过程更加便捷，本研究引入了纸片法作为替代方案。纸片法是随着检验技术进步而产生的一种新型微生物检测技术，具代表性的便是3MTMPetrifilmTM菌落总数测试片，其包含营养成分、冷水可溶性凝胶及双联指示剂技术。因此，它可通过将含有营养成分和指示剂的纸片，直接接触待测表面或放置于空气中，利用细菌在纸片上的生长形成菌落来进行快速检测。王勇等研究[4]提出，纸片法具有操作简便、检测速度快、成本低廉等优点，适合在资源有限的环境中使用。鉴于此，本研究随机选取新乡市50所托幼机构进行采样分析研究，旨在通过与传统平板计数法的对比实验，探讨纸片法在托幼机构环境菌落总数检测中的应用效果，进而为相关卫生政策的制定和实践提供科学依据，详细阐述报告如下。

1、资料与方法

1.1 一般资料

随机选取新乡市50所托幼机构为研究对象，对机构中的工作人员、物品及室内空气进行纳入采样，分别为手部皮肤(n=100)、物品表面(n=100)、室内空气(n=50)。

1.2 方法

设备与试剂：无菌生理盐水、纯水机、高压灭菌器、营养琼脂培养基、加样枪、恒温培养箱、3MTMPetrifilmTM菌落总数测试片(3M中国有限公司)。

1.2.1 采样方法

工作人员的手部皮肤采样：用镊子夹取1枚棉球浸润到无菌生理盐水中，并对待检测工作人员的手部皮肤进行来回擦拭，共计两个来回，完成后放入装有10 mL无菌生理盐水的采样管中送检。

物品表面采样：用镊子夹取1枚棉球浸润到无菌生理盐水中，并对待检测物品表面进行擦拭，采集面积为100 cm2，不足时便采取全部表面。

室内空气采样：采用直径9 cm的营养琼脂平皿、水化好的3MTMPetrifilmTM菌落总数测试片，以自然沉降法采样5 min，然后送实验室培养。

1.2.2 检验方法

工作人员的手部皮肤及物品表面样本的检测：(1)平板计数法，对采样管进行充分摇晃震荡后，另将1 mL稀释后的洗脱液(稀释比例1∶10)加入9 cm无菌平皿之中，待营养琼脂降温到45℃，然后将采样管内部的液体倒入平皿中。(2)纸片法，取出1 mL洗脱液(稀释比例1∶10)加入到于3MTMPetrifilmTM菌落总数试纸中心，覆盖上膜，静置1～3 min，用压片轻轻平压，使样液均匀分布于培养基上，将多余气泡排走。将两种检测方案的培养基，在37℃的恒温培养箱中分别放置1 d和2 d，并记录结果。

室内空气样本的检查：将曝露于空气3/5/10/15 min的纸片与曝露于空气5 min的培养皿，分别放置37℃下的恒温培养箱中进行培养，同时培养1 d和2 d，观察空气菌落总数的变化。在每批培养中，均设空白对照组。

1.3 观察指标

使用两种检测方案(平板计数法、纸片法)对托幼机构环境的主要构成要素进行检测：(1)老师等工作人员的手部皮肤；(2)桌面、玩具等物品表面；(3)教室、寝室、活动室等室内空气情况[5]。

使用两种检测方案(平板计数法、纸片法)对托幼机构环境菌落总数进行37℃的培养，分别培养1 d和2 d，并记录详细情况。

室内空气采样时间：随机纳入10间室内空气进行检测，其中纸片法分别采样3 min、5 min、10 min、15 min，平板计数法采样5 min，随后培养1 d、2 d，并记录详细情况。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS 23.0软件进行处理，计量资料以表示，并使用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2、结果

2.1 两种检测方案菌落总数检测结果对比

两种检测方案在工作人员手部皮肤、物品表面的检测结果无显著差异性(P>0.05)，纸片法培养的室内空气评估结果显著高于平板计数法，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两种检测方案菌落总数检测结果比较

单位：cfu/cm2

2.2 两种检测方案不同时间菌落培养情况比较

在不同时间菌落培养方面，平板计数法培养(工作人员手部皮肤、物品表面、室内空气)1 d与2 d的结果存在显著差异，且培养2 d后的结果显著高于1 d，差异有统计学意义(P<0.05)；但纸片法培养(工作人员手部皮肤、物品表面、室内空气)1 d与2 d的结果情况基本一致，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 两种检测方案不同时间菌落培养情况比较

单位：cfu/cm2

2.3 不同采样时间室内空气检测情况比较

在室内空气采样时间方面，培养1 d的结果中，纸片法3 min、5 min、10 min、15 min采样的结果均高于采样5 min的平板计数法，差异有统计学意义(P<0.05)；但是在培养2 d的结果中，纸片法仅在3 min、5 min采样结果高于采样5 min的平板计数法，差异有统计学意义(P<0.05)，采样时间在10 min、15 min时，差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 不同采样时间室内空气检测情况比较

3、讨论

托幼机构作为儿童早期发展的关键场所，其卫生状况直接关系儿童的健康成长和疾病预防[6]。因此，托幼机构的卫生情况是家长与疾病预防控制中心等人员关注的重点。环境菌落总数，作为衡量微生物污染水平的重要微生物学指标[7]。实际研究应用中，研究者多以此为工具对托幼机构的环境卫生进行评估。目前传统方案中，平板计数法被广泛应用于环境菌落总数的检测[8]。然而，随着抽样量的增大，其缺点也逐渐显露出来，如需设置专用的检验室及专业人员，整体流程准备工作繁琐，操作繁琐，后期清洗和灭菌工作量大等，这大幅度限制其在日常检测中的广泛应用[9]。因此，开发一种简便、快捷且准确的替代检测方法，对于提升托幼机构卫生监测的效率和效果，具有重要的实际意义[10-11]。随着生物技术的发展，检测方案不断更新，纸片法便是其中之一。以3MTMPetrifilmTM菌落总数试纸为主要代表的检测方法，目前多应用于食品、水质检测[12]。在托幼机构环境菌落总数的检测尚未见广泛应用，具有较大研究潜力。

本研究结果显示，托幼机构环境菌落总数检测结果方面，两种检测方案在工作人员手部皮肤、物品表面的检测结果无显著差异性(P>0.05)，但是在检测评估室内空气时，纸片法培养后的结果显著高于平板计数法培养后获得的结果，两者间存在显著差异(P<0.05)。这证明，纸片法操作简便，培养基更有利于托幼机构环境菌落生长；平板计数法操作复杂，受多种因素影响，如空气流动、微生物种类和分布、温度、湿度等。因此，在托幼机构的环境菌落总数检测中，应用纸片法的优势更加明显。托幼机构环境菌落培养时间方面，平板计数法培养结果(工作人员手部皮肤、物品表面、室内空气)1 d与2 d之间，存在显著差异，培养2 d后的结果显著高于1 d的结果(P<0.05)。但是在纸片法培养结果中，1 d与2 d的结果情况基本一致，无显著差异性(P>0.05)。这表明平板计数法将培养时间延长，能够明显对细菌繁殖产生促进作用，对于纸片法，过长的检测时间，会造成不必要的时间浪费。因此，本研究建议平板计数法培养2 d为适宜时间，纸片法培养1 d为适宜时间。这也进一步显示纸片法不仅能够提供与传统平板计数法相媲美的准确性，还能够显著提升检测的效率。不同检测方案室内空气采样时间方面，培养1 d的结果中，纸片法在3 min、5 min、10 min、15 min采样的结果均高于采样5 min的平板计数法，存在显著差异(P<0.05)；但是在培养2 d的结果中，纸片法仅3 min、5 min采样结果高于采样5 min的平板计数法(P<0.05)，一旦采样时间在10 min、15 min时，两者间无显著差异性(P>0.05)。证明纸片法存在随着采样时间的延长，检测结果逐渐降低的趋势。而且也表明用纸片法对室内空气检测时，采样10 min为适宜采样时间。基于本研究的发现，本研究建议托幼机构在制定和执行常规卫生监测计划时，可以考虑引入纸片法，来作为提高检测效率和响应速度的手段。同时，建议相关领域的研究者在未来的研究中，可以进一步探索纸片法在不同环境条件和类型样本中的适用性，以及如何优化检测参数以实现更高的准确性和效率。最大限度地发挥纸片法在环境卫生监测中的潜力，为保障儿童的健康和安全做出贡献。

综上所述，托幼机构环境中进行菌落总数检测时，应用纸片法的效率更高，整体应用的价值较为理想，符合研究预期，具有应用意义。

参考文献:

[2]刘军,费春楠,纪学悦,等.托幼机构环境物体表面常用消毒剂筛选及消毒效果[J].中国学校卫生,2019,40(9):1428-1430.

[3]龙遗芳,谭小华,曾汉日,等.儿童聚集性场所肠道病毒污染现况调查[J].中国公共卫生,2020,36(7):1080-1082.

[4]王勇,钱慧雯,郑晓,等.2013—2017年浦东新区托幼机构消毒质量监测结果分析[J].中国消毒学杂志,2019,36(6):464-466.

[5]袁月荣,赵虹,李保军,等.宁波市海曙区托幼机构消毒效果调查[J].环境与健康杂志,2020,37(9):830-831.

[6]范俊华,田靓,张玉成,等.上海市托幼机构消毒质量监测报告[J].中国消毒学杂志,2021,38(1):40-42.

[7]中国疾病预防控制中心新型冠状病毒肺炎疫情一级响应重点场所防护与消毒技术组,北京市疾病预防控制中心新冠肺炎防控工作舆情宣教组学校宣传组,潘力军,等.托幼机构新型冠状病毒肺炎疫情防控技术要求[J].中国学校卫生,2020,41(5):651-653.

[9]张超锋.平板计数法检测化妆品中需氧细菌总数的不确定度评估[J].工业微生物,2024,54(3):126-130.

[10]贾平骜,张锐鹏,黄牧.2015—2019年沈阳市托幼机构消毒质量监测结果分析[J].中国消毒学杂志,2020,37(9):707-709.

[12]刘珂,余希.平板计数法与纸片法检测食品微生物菌落总数的比较分析[J].现代食品,2023,29(2):191-193.

文章来源:魏薇.纸片法与平板计数法在托幼机构环境菌落总数检测中的应用分析[J].临床研究,2025,33(01):196-198.