1、前言

沙枣（拉丁文名：Elaeagnus angustifolia Linn.），为胡颓子科胡颓子属植物。天然沙枣分布在年降水量较低半荒漠、荒漠或沙漠，并由此得名“沙枣”。沙枣可抵抗沙尘且耐贫瘠，沙枣树常用于防风固沙。而新疆沙枣主要分为两种，一种为尖果沙枣（Elaeagnus oxycar Pa Schlecht.），果实相对较小，两端较尖，由此得名。由于果实小，且乌鸦、麻雀等鸟类喜食，又被称为“乌鸦沙枣”。另一种是大果沙枣（Elaeagnus.moorcroftii Wall.ex Schlecht.），面呈现浅黄至红褐色，外观呈椭圆形，粉质，果实味道香甜，营养价值高，常被人们所食用。

沙枣是一种多种营养物质的果实，包括多种成分，如：多糖、生物碱、多酚、多萜、多烯酸、黄酮等。霜降前后沙枣含糖量最高，食用后饱腹感极强。在新疆，沙枣常被用于酿酒或糕点的制作，也用于制备沙枣汁，是当地特色饮料。沙枣也是我国新疆地区一种重要的经济作物，新疆人称为“廉价的宝贝”。其味道辛涩、药性微凉，具有清热解毒、抑菌消炎、活血止血等作用，作为新疆有代表性的民族药，其对于细菌性痢疾、腹泻等疾病有一定的治疗作用[4]。

腹泻，是以患者胃肠蠕动增加、粪便次数和粪便量增多、稀便率增大为主要症状、多种致病原、多种因素引起的胃肠道不适的疾病[5]。腹泻可由多种原因引起，西药治疗腹泻虽然具有起效快、作用强的优点，但也会带来一些较为严重的不良反应，给患者带来不适或痛苦[6]。近年来随着中医药的不断发展，中草药在腹泻的治疗中发挥着独特的优势和功效，如：药物资源丰富，环境污染小，廉价易于购买、对机体的毒副作用小、不良反应较轻等[7]。

国内外对沙枣研究较多，且证实新疆沙枣可以调节胃肠道功能状态，如：抑制胃酸分泌、保护胃黏膜防止胃酸侵蚀从而改善胃溃疡，还具有抑制小肠蠕动作用，降低小肠推进率，可以用于腹泻的预防与治疗[8]。但是未见文献报道大果沙枣抑制胃肠蠕动的作用与剂量之间的关系。本研究旨在通过观察新疆大果沙枣不同剂量的水提物和干粉对蓖麻油导致的腹泻动物模型的作用，探究新疆沙枣传统用法的抗腹泻药效及其量效关系，为腹泻患者提供一个全新的治疗手段，为后续沙枣的药用开发提供基础性研究。

2、仪器与材料

2.1实验动物与仪器

昆明种小白鼠，雌雄各半，体重18～22g（购于新疆医科大学动物饲养中心，动物合格编码：SCXK（新）2022-0001）；分析天平（苏州克瑞斯仪器有限公司）；电热恒温烘箱（南京双飞节能科技有限公司）；高压磨粉机（上海谷宁仪器有限公司，型号DFY-200C）；超纯净水机（成都唐氏科技发展有限公司）；离心机（湖南麦克尔实验仪器有限公司，型号RZ-40）；酶标仪（济南佳万生物技术有限公司，型号BIOBASE-EL10B）；电磁炉（浙江苏泊尔股份有限公司）；移液枪（上海力辰邦西仪器科技有限公司，规格200μL);96孔细胞培养板（上海立峰生物技术和开发有限公司）等。

2.2样品与试剂

大果沙枣（产于新疆喀什）；蒙脱石散（浙江海力生制药有限公司、国药准字H19980050）；医用蓖麻油（河北省武邑县炎威医用化工厂，批号20230312）；氢氧化钠（河北鸿状元教育科技有限公司，批号202210）；明胶（福辰（北京）化学试剂有限公司，批号20230117）；墨汁（杭州六品文化创意有限公司，批号20221008）；苯酚红（天津基准化学试剂有限公司，批号20230226）；生理盐水（安徽靓水亭医疗器械有限公司，批号20230208）。

3、实验方法

3.1样品的制备

不同浓度的大果沙枣水提取物溶液和大果沙枣干粉混悬液的制备。大果沙枣水提取物溶液：沙枣果实去核烘干，称取200g果肉，采用煎煮法，按固液比1∶12.5加入2.5L纯净水煎煮，煎煮时不断搅拌，2h后用四层医用纱布过滤掉沙枣果实残渣，保留滤液。继续煎煮滤液，将其浓缩至200m L，得沙枣水提物母液，即得水提取物浓度为1m L溶液含生药量1.0g。冰箱4℃冷藏条件下保存，临用前将母液放至室温后用生理盐水配置成160mg/m L、80mg/m L、40mg/m L、20mg/m L、10mg/m L浓度的溶液[10]。

大果沙枣干粉溶液：称取200g沙枣干燥去核果肉，用粉碎机粉碎，过40目筛，干燥通风处储存，临用前用生理盐水将沙枣干粉配制成浓度为160mg/m L、80mg/m L、40mg/m L、20mg/m L、10mg/m L的混悬液[10]。

3.2大果沙枣水提物和干粉对正常小鼠肠推进的作用

取健康、活泼的昆明种小白鼠72只，雌雄各半，体重约为（20±5)g，随机分为12组，分别为空白组、蒙脱石散组、沙枣水提物和沙枣干粉各5个剂量组（分别为0.2、0.4、0.8、1.6、3.2g/kg），每组6只。给药前禁食不禁水12h，采取灌胃的方法按剂量给药1次。给药后30min，每只小鼠灌胃给予墨汁0.25m L,20min处死小鼠，取小肠，测量其总长和炭末推进长度，并计算小肠炭末推进率。

3.3大果沙枣水提物和干粉对正常小鼠排便的影响

取健康、活泼的昆明种小白鼠156只，雌雄各半，体重约为（20±5)g，随机分成13组（12只/组），分组情况及实验处理方法如下（见表1）。给药前小鼠禁食不禁水12h，每天按表1灌胃给药或生理盐水1次，处理6d。末次给药后，观察12h内小鼠排便情况并数干粪粒数。

表1实验动物分组及处理方法

3.4大果沙枣水提物和干粉对蓖麻油致小鼠胃肠亢进的影响

3.3实验中小鼠再给药1次，共给药7d。末次给药30min后，除空白组，其余组每只小鼠灌胃给予蓖麻油0.2m L处理。

给蓖麻油30min后，每组取6只小鼠按3.2所述方法给予墨汁，20min后观测小肠和炭末推进距离，并计算小肠炭末推进率。

每组剩余6只小鼠，按0.25m L/只的剂量灌胃给予酚红溶液，20min后处死动物，取胃，将其放入30m L的氢氧化钠溶液（0.5mol/L）中，将胃内容物全部洗出至溶液中，混匀后取2.0m L，常温下按3000r/min离心10min，取上清液150μL加入96孔板中（每个样品不得少于三个复孔），560nm波长下测得样品的吸光度，按下列公式计算小鼠的胃排空率[10]。

3.5初步毒理学评价实验

各组小鼠处死后，剥取小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏，并依次用生理盐水冲洗干净后称重，按如下公式计算小鼠的脏器指数[13]。

3.6统计学的方法与处理

利用SPSSAU对实验结果进行处理，将各组数据用平均值±标准偏差表示，通过方差分析来对比各组数据之间的差异，若P<0.05，则认为两组数据存在显著性差异，有统计学意义[14]。

4、实验结果

4.1大果沙枣水提物和干粉对正常小鼠小肠推进的抑制作用

大果沙枣水提物对正常小鼠小肠推进的影响结果显示（见表2），大果沙枣水提I组的小鼠肠推进率与空白组接近且没有显著性差异，说明其无明显作用。而水提II组至水提V组的结果显示，随着剂量由小变大，小肠炭末推进率从63.99%逐渐降至40.64%；与空白组比，这四组均能明显降低小鼠炭末推进率，呈现统计学差异（P<0.01）。该结果表明大果沙枣水提物具有抑制正常小鼠肠蠕动作用，且呈现良好的效应和剂量的依赖关系。

表2大果沙枣水提取物对正常小鼠小肠运动的抑制作用

大果沙枣干粉对正常小鼠小肠推进的影响结果显示（见表3），沙枣干粉I组无明显作用。随着剂量由干粉II组至干粉V组的逐渐增大，小肠炭末推进率从69.41%逐渐降至41.16%；与空白组相比，这四组干粉溶液均能降低小鼠炭末推进率，也呈现统计学差异（P<0.01）。该结果表明大果沙枣干粉具有抑制正常小鼠肠蠕动作用，且呈现良好的量效依赖关系。

表3大果沙枣干粉对正常小鼠小肠运动的抑制作用

图1各组药物对正常小鼠小肠蠕动抑制作用

大果沙枣水提物和干粉的结果比较显示，相同剂量下，两组间差异无统计学意义（P>0.05），说明沙枣水提物和干粉对于正常小鼠小肠蠕动的抑制作用相当，但从图1可见，干粉的抑制肠蠕动作用比水提物的作用要强一些。

4.2大果沙枣水提物和干粉对正常小鼠排便的影响

如表4所示，对于正常小鼠，沙枣干粉可使小鼠12h粪便量由40.30降低至25.13，大果沙枣水提物使小鼠12h粪便量由40.90降低至26.70。随着沙枣水提物和干粉剂量增大，12h内小鼠粪便数逐渐减少，与空白组比，除水提物0.2g/kg组外（P>0.05），其余结果均有统计学差异（P<0.05），对比同剂量组，大果沙枣水提物与干粉对小鼠12h内粪便量的影响基本无太大差异。

表4各组药物对小鼠12h内粪便排出量的影响

4.3大果沙枣水提取物和干粉对腹泻模型小鼠小肠推进的抑制作用

图2各给药组小鼠12h内粪便排出量的影响

由表5、表6及图3结果可知，与空白组相比较，模型组小鼠炭末推进率的差异具有统计学意义（P<0.01），证明本实验所给蓖麻油剂量可致小鼠腹泻，造成小肠蠕动亢奋。给药7d后，5个剂量组中从小剂量开始，随剂量逐渐增大，沙枣水提物组中小鼠肠推进率从64.98%逐渐降低到29.51%，干粉组中小肠推进率从57.83%逐渐降低到31.82%。与模型组比，水提物、干粉各组的小肠推进率均有统计学差异（P<0.01），这些结果均表明不同剂量的大果沙枣水提物和干粉长期给药均有抗小肠亢奋作用。

比较相同剂量的大果沙枣水提物和干粉的结果显示，0.2g/kg组间有统计学差异（P<0.05），其他组间结果比较均无统计学差异（P>0.05），表明给药剂量≥0.2g/kg时，水提物和干粉对小鼠肠推进的抑制作用相当。这些结果均表明大果沙枣水提取物、干粉对蓖麻油所致小鼠肠亢进具有抑制作用，且抑制作用随剂量增大而增强，药理效应具有明显的剂量依赖性。

表5大果沙枣水提物对蓖麻油所致小鼠小肠蠕动亢进的抑制作用

表6大果沙枣干粉对蓖麻油所致小鼠小肠蠕动亢进的抑制作用比较

图3各组药物对蓖麻油所致小鼠小肠运动亢进的抑制作用

4.4大果沙枣水提取物和干粉对腹泻模型小鼠胃排空的抑制作用

大果沙枣水提取物和干粉对小鼠胃排空的抑制作用见表7，由结果可知，水提物中小鼠胃排空率从63.49%逐渐降低至25.56%，干粉中胃排空率由62.89%逐渐降低至28.78%。模型组与空白组相比较，小鼠胃排空率该项指标的差异具有统计学意义（P<0.01），证明蓖麻油可导致小鼠腹泻，造成胃排空亢奋。其他给药组与模型组相比较，大果沙枣水提物、干粉各组的胃排空率差异有统计学意义（P<0.01）。说明沙枣水提物和干粉可以明显地抑制蓖麻油所引起的小鼠胃排空亢进作用。对比数据得知，相同剂量水提物和干粉组间的差异均无统计学意义（P>0.05），说明大果沙枣水提物和干粉对小鼠胃排空的抑制作用基本一致。但随着给药剂量的增大，小鼠胃排空率降低，说明了沙枣水提取物、干粉对小鼠胃排空的抑制作用具有剂量依赖性。

表7沙枣水提取物和干粉对蓖麻油所致小鼠胃排空亢进的抑制作用

图4各组药物对蓖麻油所致小鼠胃排空亢进的抑制作用

4.5大果沙枣提取物对小鼠脏器指数的影响

根据表8和图5结果可知，不同给药组的心、肝、脾、肺、肾脏器指数与空白组和模型组比较，均无显著性（P>0.05），表明在实验设计剂量和给药周期内，不会引起小鼠脏器质量和功能发生改变，即无毒。

表8各组药物对小鼠脏器指数的影响

图5各组小鼠脏器指数情况

5、结论与讨论

本研究中模型组通过蓖麻油造模后30min内，部分小鼠出现明显的不适，如：活动次数明显减少、身体颤抖、粪便不成粒呈现水糊状、粪便次数增加甚至造成极个别小鼠死亡等现象。而其他给药组随着给药剂量的增加该现象得到有效的缓解，尤其为高剂量组基本无此症状。小鼠粪便量数据显示组内方差较大，可能小鼠粪便量受多方面的原因影响造成，如小鼠周龄、体质、昼夜、进食量、饱腹感等，由此方差较大。但是分析结果仍然可以看出沙枣水提物和干粉对小鼠粪便排出起着抑制作用。通过对比脏器指数可知，本研究所给沙枣水提物和干粉的剂量不引起小鼠的脏器损害作用，可初步证实本研究中沙枣的提取物和干粉对于小鼠无损害[13]。

通过实验，由沙枣水提物和干粉1次给药对正常小鼠肠推进的数据可知，除0.2g/kg剂量组无明显作用，其他剂量组均表现明显抑制肠推进活动作用；对蓖麻油致小鼠小肠运动亢进的实验结果显示，连续给药6d，沙枣水提物和干粉各剂量组均能减少小鼠排便粒数；给药7d，沙枣水提物和干粉各剂量组均能减慢小肠蠕动功能。以上结果均表明沙枣水提物和干粉均具有抗腹泻作用，但长期给药，干粉抗腹泻作用稍强一些。

大果沙枣具有较好的药理活性和保健功能，且具有分布广、面积大、产量高的特点，药性也比较温和，是理想的民族药材。本研究证实新疆大果沙枣水提物和干粉具有抗腹泻作用。该研究结果将为新疆大果沙枣的药食两用开发奠定基础和提供理论依据，也为临床抗腹泻治疗提供新的治疗方法夯实研究基础。

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基金资助:新疆少数民族科技人才特殊培养计划科研项目(2021D03008);自治区公益性科研院所基本科研业务经费资助项目(KY2023086);

文章来源:夏提古丽·阿不利孜,石磊玲,徐磊,等.新疆大果沙枣提取物对小鼠肠推进和胃排空的影响[J].新疆中医药,2024,42(05):11-16.