胃癌是全球常见的恶性肿瘤之一，根据国际癌症研究机构GLOBOCAN项目的估计，全球每年新增胃癌病例100万余例(占所有癌症确诊病例的5.7%),并有782 685例胃癌相关的病例死亡。胃癌的发病率在全球恶性肿瘤中位居第5位，其死亡率位居第3位，仅次于肺癌和结直肠癌[1-2]。近年来，历史上胃癌发病率较高的地区(如日本、韩国)已观察到稍有下降的趋势，但胃癌在世界大部分地区仍保持着75%的高病死率，并且是全球残疾调整生命年负担的主要因素，故目前胃癌仍是一个全球性的健康问题[3]。临床上，外科手术、化疗、放疗是治疗胃癌的主要方法，其中外科手术是唯一能治愈胃癌的方法。但由于胃癌早期缺乏典型症状，以及我国目前胃癌普查、诊疗现状较差等因素影响，多数患者在疾病确诊时已处于疾病进展期，整体手术疗效欠佳，且5年生存期不超过30%[4]。因此，全面地了解胃癌发病和进展的机制至关重要，有利于确定与其相关的诊断或预后预测的生物标志物和治疗靶点。

众所周知，基因的致癌作用主要通过基因的转录和编码蛋白质来发挥。然而，人类基因组中超过90%的基因是非编码基因，在大多数系统中发挥着调控作用。编码RNA可以在表观遗传修饰、转录和转录后等不同水平上调节基因表达，其中长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA,可以在转录水平上直接或间接与靶基因相互作用，在生理和病理条件下参与细胞分化、翻译、转录、凋亡等多种生物学过程；同时，它们还可以充当竞争性内源RNA(ceRNA)或小RNA分子的前体，促进肿瘤发生和进展[5]。近年来有研究发现，lncRNA在肝癌、结肠癌、胃癌等多种恶性肿瘤中出现异常表达，参与肿瘤的进展[6]。小核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG1)是SNHG家族成员之一，是一种新型lncRNA,目前已被证明SNHG参与多种疾病的发生，包括恶性肿瘤进展、细胞凋亡和增殖等[7]。在分子机制方面，SNHG家族成员可通过ceRNA机制隔离某些微小RNA(miRNA),从而导致一系列致癌基因的间接上调。这些SNHG家族成员还可以诱导细胞中的表观遗传变化，直接与信使RNA结合，并通过防止泛素化来改变蛋白质稳定性[8]。大多数Lnc-SNHG成员在消化道恶性肿瘤的进展中发挥着至关重要的作用，如lncRNA SNHG5上调CTNNB1、MYC和CCND1的表达，激活Wnt信号通路，进而诱导上皮间质转化，促进肝癌细胞的侵袭。另外，lncRNA SNHG17与EZH2结合并抑制CDKN2B和CDKN1C的表达，促进胃癌细胞周期进展；lncRNA SNHG1还可以抑制miR-302/372/373/520对TGFB1/SMAD3和RAB11A/Wnt信号通路的影响，从而促进垂体肿瘤细胞的生长、迁移和转移。然而，lncRNA SNHG1在胃癌组织中的表达水平仍不清楚。

胃癌的发生、发展是多个因素综合作用的结果，其中幽门螺杆菌感染是引发胃癌的重要危险因素，多数研究显示幽门螺杆菌能诱发一系列黏膜病变，最终发展为胃癌[9]。目前鲜有关于lncRNA SNHG1与胃癌患者幽门螺杆菌感染关系的研究报道。基于此，本研究以2020年3月至2023年3月在本院行手术切除治疗的120例胃癌患者为研究对象，探讨lncRNA SNHG1在胃癌患者中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系。现报道如下。

1、资料与方法

1.1一般资料

选取2020年3月至2023年3月120例在本院行手术切除治疗的胃癌患者作为研究对象。纳入标准：(1)符合2018版《胃癌诊疗规范》[10]中原发性胃癌相关诊断标准，且经胃镜、病理学等检查证实；(2)均行手术切除治疗；(3)术前未接受化疗、放疗等其他治疗；(4)无13C尿素呼气试验禁忌证。排除标准：(1)合并肝癌、大肠癌等其他恶性肿瘤；(2)继发性胃癌；(3)出现淋巴结及远处转移；(4)合并血液系统疾病、自身免疫性疾病；(5)合并严重肝脏、肾脏、心脏等其他重要器官疾病；(6)妊娠及哺乳期女性。本研究方案已通过本院伦理委员会审批，所有患者均已被告知研究目的及研究内容，并签署知情同意书。

经13C尿素呼气试验检测(参考值为0～4 dpm, <4 dpm为阴性，>4 dpm为阳性[11])将120例胃癌患者根据是否存在幽门螺杆菌感染分为幽门螺杆菌阳性组(n=78)和幽门螺杆菌阴性组(n=42)。幽门螺杆菌阳性组中男46例，女32例；年龄43～74岁，平均(59.51±9.43)岁；体重指数(BMI)19～26 kg/m2,平均(23.37±1.03)kg/m2;肿瘤TNM分期：Ⅰ级5例，Ⅱ级21例，Ⅲ级43例，Ⅳ期9例；肿瘤最大径2～11 cm,平均(4.61±0.52)cm;肿瘤位置：胃体17例，贲门胃底36例，胃窦25例。幽门螺杆菌阴性组中男25例，女17例；年龄42～75岁，平均(59.60±9.51)岁；BMI 19～26 kg/m2,平均(23.44±1.09)kg/m2;肿瘤TNM分期：Ⅰ级3例，Ⅱ级11例，Ⅲ级23例，Ⅳ期5例；肿瘤最大径2～11 cm,平均(4.61±0.52)cm;肿瘤位置：胃体9例，贲门胃底19例，胃窦14例。两组患者的一般资料(性别、年龄、BMI、肿瘤TNM分期、肿瘤最大径、肿瘤位置)比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2方法

利用实时荧光定量-聚合酶链反应(qPCR)检测患者胃癌组织及癌旁组织中lncRNA SNHG1表达情况。手术切除收集患者胃癌组织及癌旁组织(距癌组织边缘>5 cm)标本，立刻进行液氮速冻处理，然后保存于-80℃冰箱待测。分别取100 mg癌旁组织与胃癌组织，用剪刀剪碎、组织研磨仪器充分研磨后，采用Trizol法(试剂盒选自上海联迈生物工程有限公司)提取组织中总RNA,通过NanoDrop 2000型分光光度计(美国Thermo公司)测定RNA的浓度和质量。利用逆转录试剂盒Prime-script RT Reagent Kit(日本Takara公司)进行逆转录，合成cDNA。反应体系为20μL,反应条件为95℃预变性5 min, 95℃变性30 s, 60℃退火1 min, 72℃延伸30 s,共40个循环。癌组织及癌旁组织各重复检测3次。以U6作为内参基因，采取2-ΔΔCt法计算组织中lncRNA SNHG1相对表达量。具体操作严格按照仪器与试剂盒说明书进行。引物序列见表1。

表1引物序列

1.3统计学处理

采用SPSS24.0统计学软件完成数据分析，计数资料以频数或百分率描述，组间比较采用χ2检验，符合正态分布的计量资料以

描述，组间比较采用t检验。采用Pearson关性分析胃癌组织中lncRNA SNHG1表达情况与幽门螺杆菌感染的相关性。检验水准α=0.05,以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结 果

2.1癌组织与癌旁组织中lncRNA SNHG1相对表达量比较

与癌旁组织(2.04±0.66)相比，胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量(4.36±0.95)明显升高，差异有统计学意义(t=21.970,P<0.001)。见图1。

图1癌组织与癌旁组织中lncRNA SNHG1相对表达量

2.2幽门螺杆菌阳性组与阴性组癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量比较

与幽门螺杆菌阴性组患者(3.11±0.76)相比，幽门螺杆菌阳性组患者胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量(5.61±1.24)明显升高，差异有统计学意义(t=18.830,P<0.001)。

2.3胃癌组织中lncRNA SNHG1表达情况与幽门螺杆菌感染的关系

采用Pearson相关分析lncRNA SNHG1表达情况与幽门螺杆菌感染的关系，结果显示：胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量与幽门螺杆菌感染呈正相关(r=0.491,P<0.001)。

3、讨 论

国家癌症中心最新统计数据显示，我国胃癌的发病率位居恶性肿瘤的第二位，我国每年新发胃癌患者超67.9万例，死亡人数高达49.8万例，约占全球胃癌病例和胃癌相关死亡的50%。随着我国生活结构改变及人口老龄化加剧，其发病率、死亡率均逐年上涨，不仅影响患者身心健康，还给家庭和社会造成巨大经济负担[12]。胃癌的发生发展与诸多因素关系密切[13]。在我国，除了咸味、烟熏食物和不良的饮食结构外，胃癌的发生还与常见的幽门螺杆菌感染密切相关。胃癌的生存主要与临床分期有关，不少于70%的局限性胃癌患者在全胃或次全胃切除术后化疗后可以存活5年。然而，大多数早期胃癌患者是无症状的，待出现症状、确诊时已至胃癌中晚期，治疗手段及效果较差，胃癌患者的预后不良。因此早期诊断胃癌是至关重要的。近些年虽然我国在胃癌诊治上付出了巨大努力，但目前仍是一项难以攻克的问题。

有研究显示，lncRNA在多种恶性肿瘤中异常表达，可通过mRNA剪接、染色体剂量补偿、核质转运、基因组印记等机制参与多种生物过程，如细胞分化、细胞周期等，与肿瘤发生、发展及预后密切相关[14-15]。目前研究发现，lncRNA与胃癌进展之间的关联，lncRNA是胃癌发生、发展、转移和胃癌肿瘤细胞逃避免疫系统的关键调节因子[15]。lncRNA可以通过调节表观遗传修饰、转录和转录后修饰来调节相关基因的表达。例如，lncRNA HNF1A-AS1通过增强细胞周期调节因子的表达和促进p21泛素化介导的降解来促进胃癌肿瘤细胞的增殖和细胞周期进展，在代谢应激下，结肠癌相关转移基因1反义RNA(MACC1-AS1)通过增加AMPK/Lin28介导的MACC1mRNA稳定性来增强胃癌肿瘤细胞糖酵解和抗氧化活性。lncRNA SNHG1是近年来新发现的一种lncRNA,在多种恶性肿瘤中扮演着致癌因子角色，然而，其在胃癌中的表达及与胃癌的关系尚不清楚，故本研究旨在探索lncRNA SNHG1在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌进展之间的关系。

本研究qPCR检测结果显示，与癌旁组织相比，胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量明显升高，这说明lncRNA SNHG1可能参与了胃癌的进展，与ZONG等[16]研究结果相似。另外有研究证实，lncRNA SNHG1与肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭等密切相关，在多种肿瘤发生发展中具有重要作用[17]。CAI等[18]指出，下调SNHG1能抑制卵巢癌细胞增殖，可作为疾病潜在治疗靶点。在子宫内膜癌中，lncRNA SNHG1高表达能上调核转录因子-κB/p65,从而激活核转录因子-κB信号通路，促进癌症发生发展[19]。在胃癌中，lncRNA SNHG1通过调节miR-195-5p/YAP1轴促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭等生物学行为[20],追溯其作用机制，可能包括以下几种可能：其一，lncRNA SNHG1能够靶向负调控miR-5195-3p表达水平，通过白细胞介素(IL)-6诱导癌细胞迁移、增殖及侵袭的作用，参与胃癌发生发展[21];其二，lncRNA SNHG1可以直接作用于信使RNA,也可以通过海绵吸附miRNA,达到竞争性内源RNA的效果，影响miRNA调控下游基因。例如，lncRNA SNHG1可通过海绵吸附miR-145,抑制miR-145调控下游基因，进而上调miR-145下游β-连环蛋白、骨髓瘤病毒原癌基因的表达，促进胃癌细胞增殖[22];其三，SNHG1与P27kip1蛋白水平呈负相关，P27kip1是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂，能调控细胞周期，参与基因转录、DNA复制、细胞分化等多种生物学进程，SNHG1可以下调P27kip1蛋白水平促进胃癌的发生及发展[23]。

另外，本研究通过13C尿素呼气试验检测结果将120例胃癌患者根据是否存在幽门螺杆菌感染分为幽门螺杆菌阳性组与幽门螺杆菌阴性组，比较两组患者胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量的差异，结果显示，与幽门螺杆菌阴性组患者相比，幽门螺杆菌阳性组患者胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量明显升高，并且Pearson相关分析显示，胃癌组织中lncRNA SNHG1相对表达量与幽门螺杆菌感染呈正相关，提示lncRNA SNHG1表达情况与胃癌患者幽门螺杆菌感染存在一定联系。胃黏膜上皮和腺体感染幽门螺杆菌后，幽门螺杆菌通过多种黏附剂和毒力因子引起炎症反应，导致宿主信号通路发生变化。此外，幽门螺杆菌感染通过诱导细胞凋亡来增加氧化应激，然后破坏细胞完整性并产生炎症相关肿瘤[24]。竟晓慧等[25]研究中发现，lncRNA PVT1表达水平在幽门螺杆菌阳性患者胃黏膜上明显上调，lncRNA PVT1在幽门螺杆菌感染相关的胃癌中能作为促炎因子，促进癌细胞迁移，参与疾病进展，这与本研究结果相似。曲雪等[26]研究表示，细胞毒素相关蛋白A阳性幽门螺杆菌能够引起胃癌细胞lncRNA DLEU2异常表达，进而参与胃癌上皮间质转化，促进胃癌进展。另外近期的一项生物信息学分析结果显示，从幽门螺杆菌感染-萎缩性胃炎-胃癌的进程中，涉及多个lncRNA的神经内分泌调节网络，不同lncRNA被证实在胃癌发生的各个阶段均具有重要作用，不仅参与肿瘤生长、转移、侵袭等过程，还与患者预后密切相关[27]。在胃癌患者中，幽门螺杆菌感染人群数量庞大，明确lncRNA与幽门螺杆菌感染的关系，可为胃癌早期诊疗提供新思路，能有效降低胃癌患病风险。

综上所述，与癌旁组织相比，lncRNA SNHG1在胃癌组织中的表达明显升高，且感染幽门螺杆菌的胃癌患者胃癌组织中lncRNA SNHG1表达升高，lncRNA SNHG1相对表达量与幽门螺杆菌感染呈正相关，lncRNA SNHG1有望成为胃癌治疗的新靶点，为胃癌患者的临床诊疗提供新的思路。

参考文献:

[1]中国抗癌协会胃癌专业委员会.CACA胃癌整合诊治指南(精简版)[J].中国肿瘤临床,2022,49(14):703-710.

[10]国家卫生健康委员会.胃癌诊疗规范(2018年版)[J/CD].中华消化病与影像杂志(电子版),2019,9(3):118-144.

[11]李慧娟,樊路娟,酒康楠,等.13C尿素呼气试验在幽门

基金资助:湖北省卫生健康委面上项目(WJ2021M199);

文章来源:段元山,曲艺琳,杨楷.lncRNA SNHG1在胃癌患者中的表达及与幽门螺杆菌感染的关系[J].国际检验医学杂志,2024,45(18):2277-2281.